[发明专利]用于检测患者样品中的生物制品的间接均相迁移率变动试验

权利要求书

1.一种用于测定样品中生物制品的存在或水平的方法，该方法包括：

(a)将样品接触结合生物制品的未标记的可溶性抗原，以在抗原和样品中的生物制品之间形成未标记的复合物；

(b)将来自步骤(a)的样品接触标记形式的生物制品，以在抗原和标记的生物制品之间形成标记的复合物；

(c)将未标记和标记的复合物进行大小排阻色谱，以将未标记和标记的复合物与游离的标记生物制品分离，并检测游离的标记生物制品的量；和

(d)将步骤(c)中检测的游离的标记生物制品的量与已知量的生物制品的标准曲线进行比较，由此确定样品中生物制品的存在或水平。

2.权利要求1的方法，其中抗原包括膜结合蛋白、糖基化蛋白、多聚体蛋白、不溶性蛋白、难以表达或纯化的蛋白和/或大蛋白的可溶性片段、变体或单体。

3.权利要求1或2的方法，其中抗原是细胞表面分子的可溶性片段。

4.权利要求3的方法，其中细胞表面分子是细胞粘附分子(CAM)。

5.权利要求4的方法，其中细胞粘附分子(CAM)是选自Ig超家族CAM、整联蛋白、钙粘蛋白和选择蛋白的成员。

6.权利要求5的方法，其中整联蛋白是α4β7整联蛋白。

7.权利要求6的方法，其中可溶性片段包含α4片段和/或β7片段，所述α4片段包含与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述β7片段包含与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4具有至少80％同一性的氨基酸序列。

8.权利要求6或7的方法，其中生物制品是维多珠单抗。

9.权利要求1或2的方法，其中抗原是细胞因子或其单体。

10.权利要求9的方法，其中细胞因子是IL-12或IL-23的p40亚基。

11.权利要求10的方法，其中p40亚基包含与SEQ ID NO:6、7、11、12或13具有至少80％同一性的氨基酸序列。

12.权利要求10或11的方法，其中生物制品是优斯它单抗。

13.权利要求1至12任一项的方法，其中通过用连续稀释的已知量的生物制品孵育抗原和标记的生物制品来产生标准曲线。

14.权利要求1至13任一项的方法，其中将游离的标记生物制品的曲线下面积(AUC)相对于已知量的生物制品的对数作图，并通过内推计算样品中的生物制品的水平。

15.权利要求1至14任一项的方法，其中样品是血清。

16.权利要求1至15任一项的方法，其中标记的生物制品是荧光团标记的生物制品。

17.权利要求1至16任一项的方法，其中从接受生物制品治疗的受试者获得样品。

18.分离的可溶性α4整联蛋白多肽，其包含与SEQ ID NO:1具有至少80％同一性的氨基酸序列。

19.权利要求18的分离的可溶性α4整联蛋白多肽，进一步包含ACID肽。

20.权利要求18或19的分离的可溶性α4整联蛋白多肽，进一步包含接头。

21.权利要求18至20任一项的分离的可溶性α4整联蛋白多肽，其中所述氨基酸序列与SEQ ID NO:3具有至少80％同一性。

22.权利要求18至21任一项的分离的可溶性α4整联蛋白多肽，进一步包含亲和标签。

23.分离的可溶性β7整联蛋白多肽，包含与SEQ ID NO:2具有至少80％同一性的氨基酸序列。

24.权利要求23的分离的可溶性β7整联蛋白多肽，进一步包含BASE肽。

25.权利要求23或24的分离的可溶性β7整联蛋白多肽，进一步包含蛋白酶断裂位点。

26.权利要求23至25任一项的分离的可溶性β7整联蛋白多肽，进一步包含亲和标签。

27.权利要求23至26任一项的分离的可溶性β7整联蛋白多肽，进一步包含接头。