[发明专利]用于检测干细胞的方法及试剂盒在审
申请号: | 201580077538.5 | 申请日: | 2015-12-21 |
公开(公告)号: | CN108064342A | 公开(公告)日: | 2018-05-22 |
发明(设计)人: | 馆野浩章;藁科雅岐;福田雅和;平安一成 | 申请(专利权)人: | 国立研究开发法人产业技术综合研究所;和光纯药工业株式会社 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 杨宏军 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 干细胞 方法 试剂盒 | ||
1.检测干细胞的方法,其通过检测细胞的培养上清液或溶解物中含有的足糖萼蛋白来检测干细胞,所述方法包括下述步骤:
使所述培养上清液或溶解物与对于以下(式1)或以下(式2)表示的糖链具有结合性的凝集素、和对于硫酸角质素具有结合性的抗体接触,从而形成由所述凝集素、足糖萼蛋白和所述抗体构成的复合体的步骤;和
检测所述复合体的步骤,
(式1)
(式1)中,R1表示OH基、或任意的糖链,R2表示OH基、或者任意的糖链、蛋白质、脂质、或其他的分子,
(式2)
(式2)中,R1表示OH基、或任意的糖链,R2表示OH基、或者任意的糖链、蛋白质、脂质、或其他的分子。
2.如权利要求1所述的方法,其中,所述抗体为对于低硫酸化度硫酸角质素具有结合性的抗体。
3.如权利要求1或2所述的方法,其中,所述抗体在表位中包含Gal-GlcNAc(6S)或其串联重复。
4.如权利要求1~3中任一项所述的方法,其中,所述抗体为杂交瘤R-10G(保藏编号:FERM BP-11301)产生的抗体或与该抗体竞争的抗体。
5.如权利要求1~4中任一项所述的方法,其中,所述细胞为在含有血清的培养基中进行了培养的细胞。
6.如权利要求1~5中任一项所述的方法,其中,所述凝集素为:
包含序列号1所示的氨基酸序列而成的蛋白质;或
包含该氨基酸序列中的一个或多个氨基酸被缺失、取代、插入、或添加而得到的氨基酸序列、且对于所述(式1)或(式2)表示的糖链具有结合性的蛋白质。
7.如权利要求1~6中任一项所述的方法,所述方法包括下述步骤:
使所述培养上清液或溶解物与所述凝集素接触,从而形成由该凝集素和所述培养上清液或溶解物中含有的足糖萼蛋白构成的第一复合体的步骤;
使第一复合体与所述抗体接触,从而形成由所述凝集素、足糖萼蛋白和该抗体构成的第二复合体的步骤。
8.如权利要求7所述的方法,其中,所述凝集素被结合至不溶性载体上。
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