[发明专利]一种检测黄牛Leptin基因单核苷酸多态性的方法在审
| 申请号： | 201610003228.5 | 申请日： | 2016-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN105506114A | 公开（公告）日： | 2016-04-20 |
| 发明（设计）人： | 马云;付玮玮;陈宁博;郝瑞杰;李芬;李俊雅;张路培;张琼琼;刘云云 | 申请（专利权）人： | 信阳师范学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 | 代理人： | 姜彦 |
| 地址： | 464000 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 黄牛 leptin 基因 核苷酸 多态性 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种检测黄牛Leptin基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于，以包含Leptin基因 的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，采用PCR法扩增黄牛Leptin基因的第二 外显子片段；然后用限制性内切酶PstI消化PCR扩增产物，再对酶切后的片段进行聚丙烯 酰胺凝胶电泳；根据电泳结果鉴定黄牛Leptin基因第12265位点的单核苷酸多态性为：TT基 因型表现为281bp和15bp两条带；CT基因型表现为296bp，281bp，15bp三条带；CC基因型表现 为296bp一条带；
所述的引物对P为：
P1(上游引物)：5'-GTGCCTTTCATTACTGTCATTTC-3'23bp
P2(下游引物)：5'-TGTCATCCTGGACCCTGC-3'18bp。
2.如权利要求1所述，检测黄牛Leptin基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于，所述 的PCR扩增反应程序为：
95℃预变性5min；94℃变性30s，59℃退火30s，72℃延伸30s，30～35个循环；72℃延伸 10min；4℃保存。
3.如权利要求1所述，检测黄牛Leptin基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于，所述 的聚丙烯酰胺凝胶电泳为质量浓度为12％的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳。
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