[发明专利]实时检测活体藻细胞油脂含量的荧光分光光度法

权利要求书

1.一种实时检测活体藻细胞油脂含量的荧光分光光度法，其特征是：藻细胞油脂含量的荧光分光光度法：不同种属和不同形态的微藻其结构和形状存在的差异，针对所述的微藻进行实验、测定，不同种属和不同形态的微藻所需的染色条件有所不同，包括有藻细胞溶液浓度的选择，荧光染色剂剂量的选定，染色过程的环境的选定以及荧光强度测定条件的参数选择；藻细胞浓度：1×10⁶/ml-8×10⁶/ml；藻液体积：5ml；Nilered在水相的溶度：0.5-4μg/ml；漩涡震荡时间：0.5-4min；

具体步骤如下：

（1）、小球藻油脂含量的测定方法：制备含几组相同浓度的悬浮藻细胞，将Nilered用有机溶剂溶解成0.1mg/ml后按相同剂量加入到藻悬液中；所述的有机溶剂必须经过检测具有水溶性和细胞渗透性；所述的有机溶剂为二甲亚砜；

（2）、控制染色过程的混合悬液震荡的时间参数为0.5-4min，溶液pH:6-8参数，确定最佳染色操作过程，操作参数通过荧光显微镜观察来确定；

在荧光显微镜下的A组和B组，在两种条件下的细胞形态和颜色确定染色过程的完成；A组：染色完全的藻细胞，在荧光条件下呈绿色；B组：未染色的藻细胞，在荧光条件下呈红色；

（3）、实验确定发射波，通过荧光扫描确定合适的发射光波长，不同的藻细胞实验发射波的波长范围为蓝光激发光源下420-490nm；

（4）、针对不同种属的微藻优化不同的实验操作参数，制定标准的测定方法。