[发明专利]一种检测黄牛PPARα基因单核苷酸多态性的方法在审
| 申请号： | 201610003946.2 | 申请日： | 2016-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN105463104A | 公开（公告）日： | 2016-04-06 |
| 发明（设计）人： | 马云;张琼琼;李芬;郝瑞杰;李俊雅;马福军;李何;石奎林 | 申请（专利权）人： | 信阳师范学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 | 代理人： | 姜彦 |
| 地址： | 464000 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 黄牛 ppar 基因 核苷酸 多态性 方法 | ||
1.一种检测黄牛PPARα基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于，以 包含PPARα基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR 法扩增黄牛PPARα基因；用限制性内切酶HapⅡ消化PCR扩增产物之后， 再对酶切后的片段进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳；根据聚丙烯酰胺凝胶电 泳结果鉴定黄牛PPARα基因第53869位的单核苷酸多态性为：TT基因型表 现为168bp；TC基因型表现为168bp、146bp和22bp三条带；CC基因型 表现为146bp和22bp两条带；
所述的引物对P为：
P1上游引物：5'-TTTCAGTTGGGATGTCCCATAC-3'22bp
P2下游引物：5'-TTACTTTCTTAGGCTCTCGTGTTAC-3'25bp。
2.根据权利要求1所述的检测黄牛PPARα基因单核苷酸多态性的方法， 其特征在于，所述的PCR扩增反应程序为：
95℃预变性10min；94℃变性30～50s，58℃退火30s，72℃延伸30～ 50s，30～40个循环；72℃延伸10min；4℃保存。
3.根据权利要求1所述的检测黄牛PPARα基因单核苷酸多态性的方法， 其特征在于，所述的聚丙烯酰胺凝胶电泳为质量浓度为12％的聚丙烯酰胺凝 胶进行电泳。
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