[发明专利]一种胸膜肺炎放线杆菌的ApNGT基因及其应用在审
| 申请号： | 201610012793.8 | 申请日： | 2016-01-11 |
| 公开（公告）号： | CN105505959A | 公开（公告）日： | 2016-04-20 |
| 发明（设计）人： | 程剑松;宋其涛;王鹏 | 申请（专利权）人： | 南开大学 |
| 主分类号： | C12N15/54 | 分类号： | C12N15/54;C12N9/10;C07K1/107 |
| 代理公司： | 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 | 代理人： | 朱红星 |
| 地址： | 300071 天津市南开*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 胸膜 肺炎 放线 杆菌 apngt 基因 及其 应用 | ||
1.一种胸膜肺炎放线杆菌的ApNGT基因，具有SEQNO:1所示的ApNGT基因序列。
2.一种胸膜肺炎放线杆菌的ApNGT基因，其编码的620个氨基酸序列见SEQNO2。
3.权利要求1所述胸膜肺炎放线杆菌的ApNGT基因，其中的引物SEQNO: 3CATTTCCATTTTGCATTGGGGGCATCAAACGGTATTAC为特异扩增胸膜肺炎放线杆菌的ApNGT基因 的上游引物；SEQNO:4GCCCCCAATGCAAAATGGAAATGCACTTTCACTTTG为胸膜肺炎放线杆菌的 ApNGT基因的下游引物。
4.权利要求1所述胸膜肺炎放线杆菌的ApNGT基因，其中1）包含N-X-S/T序列的多肽进 行糖基化修饰，反应为体系30ul，包含pH=8.0Tris-HCl(50mM),MgCl2(5mM),UDP-Glc (10mM),NaCl(10mM),ApNGT(0.3mg/ml),Peptide(1mM),用ddH2O补齐，37℃水浴条件下反 应45分钟，采用MALDI-TOF定性和HPLC定量；
2）在包含N-X-S/T序列的蛋白hmw1ct(NCBI:Accession:WP_014550671.1GI: 504363569,AtaC1866–2428)进行糖基化修饰，反应体系为200ul，包含pH=8.0Tris-HCl (50mM),MgCl2(5mM),UDP-Glc(5mM),NaCl(100mM),ApNGT(0.3mg/ml),Protein(1mg/ml), 37℃反应一个小时，使用MALDI-TOF定性。
5.权利要求1所述的胸膜肺炎放线杆菌ApNGT基因在制备提高糖基化多肽效率方面的 应用。
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