[发明专利]一种多肽抗原检测牛结核分枝杆菌抗体的ELISA试剂盒

权利要求书

1.一种多肽抗原检测牛结核分枝杆菌抗体的ELISA 试剂盒，其特征在于：包括牛结核分枝杆菌特异性多肽抗原包被的酶标板、阴性血清、阳性血清、抗体稀释液、用辣根过氧化物酶标记的抗牛IgG酶标抗体、底物显色液、终止液；所述牛结核分枝杆菌特异性多肽抗原为以下五种多肽抗原中的至少任意一种：

bTB-p-1 MAEMKTDAATLAQEAGNFMTEQQWNFAGIEAAAS；

bTB-p-2 QEAGNFERISGDLKTQAGIEAAASAIQGNVTS；

bTB-p-3 VVRFQEAANKQKQELDEIAIQGNVTSIHSLLDEG；

bTB-p-4 NIRQAGVQYSRADEEQQQKWDATATELNNALQNL；

bTB-p-5 RADEEQQQALSSQMGFGQAMASTEGNVTGMFA；

所述五种多肽抗原为利用牛结核分支杆菌特异性多肽，采用体外人工合成方法取得的多肽抗原。

2.根据权利要求1所述ELISA 试剂盒，其特征在于：所述牛结核分枝杆菌特异性多肽抗原包被的酶标板的制备方法是：取96孔酶标板，每孔100μL牛结核分枝杆菌特异性多肽抗原，4℃过夜包被，包被浓度为0.01μg/mL～5μg/mL，用PBST 洗涤液250μl/ 孔,洗涤2～4 次后拍干，用封闭液150μl/孔，37℃封闭1h，洗涤液PBST 250μl/ 孔洗涤3 次后拍干，放入真空袋，4℃、抽真空保存。

3.根据权利要求1所述ELISA 试剂盒，其特征在于：所述阳性血清为用抗体稀释液按照体积比为1∶20～100 的比例将牛结核分枝杆菌标准阳性血清稀释后取得的稀释阳性血清；所述阴性血清为用抗体稀释液按照体积比为1∶20～100 的比例将牛结核分枝杆菌标准阴性血清稀释后取得的稀释阴性血清。

4.根据权利要求1所述ELISA 试剂盒，其特征在于：所述抗体稀释液为0.1%BSA。

5.根据权利要求1所述ELISA 试剂盒，其特征在于：所述用辣根过氧化物酶标记的抗牛IgG酶标抗体是用HRP保护液按工作浓度比例稀释后的抗牛IgG酶标抗体。

6.根据权利要求1所述ELISA 试剂盒，其特征在于：所述底物显色液为TMB。

7.根据权利要求1所述ELISA 试剂盒，其特征在于：所述终止液为0.1SDS%或2M的H₂SO₄。