[发明专利]利用碱法提取技术生产黄芪总黄酮的工艺

说明书

技术领域

本发明属于黄芪药物提取技术领域，尤其涉及利用碱法提取技术生产黄芪总黄酮的工艺。

背景技术

黄芪为豆科植物的，味甘，性微温，归肺、脾经，具有补气升阳、益味固表、利尿消肿、生津养血、托毒排脓、敛疮生肌等功效。黄芪总黄酮是黄芪生长过程中形成的次级代谢产物之一，具有多种生物学活性；近年来，食品安全和保健性食品备受人们的青睐，黄芪总黄酮也逐渐成为被研究的热点。黄芪的化学成分分析表明主要含有黄酮类和皂甙类，而研究表明总黄酮对人体生理代谢有益的调节功能，为其开发利用展示了广阔前景。随着社会压力的增加，心脑血管疾病的急剧爆发，而黄酮有抑制肿瘤，抗炎消肿，降低血脂等功能，因此逐渐被人们所重视和研究。

目前水提法是提取中药黄酮的传统方法，水提法方法简单，操作简便易行，但是能耗较大，提取方法不稳定，提取得到的黄酮纯度不高，多含有蛋白质、核酸、淀粉等杂质。本发明为了解决上述的水提法提取到的黄芪黄酮得率不高、提取能耗大问题，根据黄芪总黄酮中大部分有效成分的理化特性及为了节约成本，引入澄清剂除杂过程和多级分离吸附作用，有效除去药物成分中的杂质，降低提取过程因需要高温过程产生的能耗，并使提取技术工艺流程趋于稳定，方法重复性好。

发明内容

本发明的目的是克服现有药用提取黄芪总黄酮纯度、提取率低等缺点，提供一种利用水提技术生产黄芪总黄酮的工艺。

本发明的实现技术方案为，一种利用碱法提取技术生产黄芪总黄酮的工艺，以黄芪为原料，其特征在于，该方法步骤包括：

1）粗提液获取：干燥黄芪根原料1kg，清洗、干燥、粉碎后，加入2~3倍碱解液，40~50℃条件下恒温浸泡2~3小时后，重复提取3次，合并碱解液液静置放凉，得到粗提液；

2）浓缩蒸发：在步骤1）得到的粗提液中加入加入天然植物提取液澄清剂KBT-ZTC，加入量为5~10g/L，静置20~30min后旋转蒸发浓缩粗提液，得到浸膏粗品；

3）溶解除杂：在步骤2）得到的浸膏粗品中加入乙醇，搅拌浸膏进行溶解，静置沉淀，离心去除上清液得到沉淀物，沉淀物再加入乙醇进行搅拌后静置，离心收集沉淀物；

4）大孔吸附树脂柱分离纯化：将步骤3）得到的沉淀物上大孔吸附树脂柱，用乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液并减压浓缩烘干，得到粗提物Ⅰ；

5）硅胶柱分离纯化：将步骤4）烘干得到的粗提物Ⅰ用乙醇溶解后上硅胶柱，用含甲醇的氯仿溶液进行洗脱，收集黄绿色洗脱液并风干，得到粗提物Ⅱ；

6）用ODS开放柱分离纯化：将步骤5）得到的粗提物Ⅱ用乙醇溶解后上ODS开放柱，用乙醇水溶液进行洗脱，收集黄绿色洗脱液并减压浓缩烘干，得到粗提物Ⅲ；

7）用中压柱分离纯化：将步骤6）得到的粗提物Ⅲ上中压柱，用乙醇水溶液洗脱，从出峰开始收集洗脱液，至峰下降后停止收集，洗脱液并减压浓缩烘干，得到粗提物Ⅳ；

8）过滤结晶：将步骤7）得到的粗提物Ⅳ用甲醇溶解，用滤膜过滤后缓慢加入水进行结晶，边加入边搅拌至出现黄色絮状物时停止搅拌，静置20-50min，滤纸过滤，将留在滤纸上的黄色药物挥干，收集挥干后的黄色药物既为黄芪总黄酮。

作为本发明的进一步限定条件，所述的清洗为用清水清洗2~3次；所述的粉碎为黄芪粉碎至50~100目。

作为本发明的进一步限定条件，所述的旋转蒸发浓缩为将粗提液蒸发至水比重d为1.0~1.50的浸膏。

作为本发明的进一步限定条件，所述的步骤3）中乙醇的加入量为浸膏的2~5倍体积。

作为本发明的进一步限定条件，所述的碱解液为碳酸钠、亚硫酸氢钠、氯化钙的混合溶液，碳酸钠、亚硫酸氢钠、氯化钙在浸取溶液中的含量分别为15~30%、15~30%、10~40%。

作为本发明的进一步限定条件，所述的天然植物提取液澄清剂KBT-ZTC为由科立尔生物科技有限公司生产的澄清剂。

作为本发明的进一步限定，所述的步骤5）中含甲醇的氯仿溶液为含1~5%甲醇的氯仿溶液。

作为本发明的进一步限定，所述的步骤4）、步骤6）、步骤7）中的乙醇水溶液为60~80%的乙醇水溶液。

作为本发明的进一步限定，所述的步骤9）中的滤膜孔径为0.35~0.5μm。

本发明取得了以下实质性进步和突出效果：