[发明专利]一种内皮祖细胞快速扩增体系

权利要求书

1.一种内皮祖细胞快速扩增体系，其特征在于，该内皮祖细胞快速扩增 体系包括内皮祖细胞扩增、内皮祖细胞动员作用、药物对内皮祖细胞扩增作用、 羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂、血管紧张素转 化酶抑制剂、雌激素、促红细胞生成素、刺激因子对内皮祖细胞扩增作用和转 基因对内皮祖细胞扩增作用，所述内皮祖细胞扩增方式分为内皮祖细胞动员作 用、药物对内皮祖细胞扩增作用、刺激因子对内皮祖细胞扩增作用和转基因对 内皮祖细胞扩增作用，药物对内皮祖细胞扩增作用相关药物为羟甲基戊二酰辅 酶A还原酶抑制剂、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂、血管紧张素转化酶抑制剂、雌 激素和促红细胞生成素。

2.如权利要求1所述的内皮祖细胞快速扩增体系，其特征在于，所述内皮 祖细胞动员作用具体通过粒细胞集落刺激因子、粒-巨噬细胞集落刺激因子和干 细胞因子动员。

3.如权利要求1所述的内皮祖细胞快速扩增体系，其特征在于，所述刺激 因子对内皮祖细胞扩增作用具体通过VEGF促进EPCs增殖，VEGF通过细胞膜 VEGFR-2受体激动蛋白激酶B，再通过三磷酸肌醇途径激活后续信号调控EPCs 的增殖。

4.如权利要求1所述的内皮祖细胞快速扩增体系，其特征在于，所述刺激 因子对内皮祖细胞扩增作用具体通过高密度脂蛋白，促进局部缺血组织的血管 生成，其机制是通过三磷酸肌醇途径通路直接刺激EPC增殖。

5.如权利要求1所述的内皮祖细胞快速扩增体系，其特征在于，所述刺激 因子对内皮祖细胞扩增作用具体可通过运动、缺氧、血管流切力、某些疾病状 态都能刺激体内EPCs的快速增殖。

6.如权利要求4所述的内皮祖细胞快速扩增体系，其特征在于，所述转基 因对内皮祖细胞扩增作用具体为转导VEGF对EPC增殖。

7.如权利要求1所述的内皮祖细胞快速扩增体系，其特征在于，所述的内 皮祖细胞通过以下方法获得：

步骤一、将多能干细胞于第一培养基中诱导分化形成中内胚层前体细胞；

步骤二、将所述中内胚层前体细胞于第二培养基中诱导分化形成血管内皮 细胞祖细胞；

步骤三、进行血管内皮细胞祖细胞集落数及细胞功能的鉴定：鉴定细胞形 态、功能及细胞表面分子的表达。

8.如权利要求7所述的内皮祖细胞快速扩增体系，其特征在于，所述的第 一培养基含有DMEM培养基、F12培养基、硒酸钠、碳酸氢钠、维生素C、胰岛 素、激活素A、骨形成蛋白4、糖原合成酶激酶-3抑制剂；所述培养基B含有 DMEM培养基、F12培养基、硒酸钠、碳酸氢钠、维生素C、胰岛素、血管内皮生 长因子和转化生长因子β信号通路抑制剂。