[发明专利]防治核桃炭疽病的生防菌株及其筛选方法与应用

权利要求书

1.一种防治核桃炭疽病的生防菌株，其特征在于，所述生防菌株为钩状木 霉(Trichodermahamatum)YB-4-15，保藏号为：CGMCCNo.11809。

2.根据权利要求1所述的防治核桃炭疽病的生防菌株，其特征在于，所述 生防菌株的菌丝对光照条件不敏感，孢子产生需要光照条件。

3.根据权利要求1或2所述的防治核桃炭疽病的生防菌株，其特征在于， 所述生防菌株菌丝生长的适宜温度为12-28℃，适宜pH值为4-8。

4.根据权利要求1所述的防治核桃炭疽病的生防菌株，其特征在于，所述 生防菌株生长的培养基为PDA培养基。

5.一种如权利要求1所述的防治核桃炭疽病的生防菌株的筛选方法，其特 征在于，包括以下步骤：

1)土壤微生物分离及指示菌株

选择大理州漾濞县光明村发病不同的核桃植株根际土壤，铲去表土层，取 10-15cm处土样，采用土壤稀释平板法进行分离，所述平板为PDA平板，28℃ 的恒温培养箱培养2-3d后，纯化长出的菌株，再将纯化菌株放入4℃冰箱保存 备用；指示菌株为胶孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides)；

2)生防菌株筛选

初筛：将步骤1)的土壤纯化菌株以及指示菌株接种于PDA平板进行活化， 采用平板对峙培养法进行筛选，即将一块直径为6mm指示菌株置于PDA平板 中央，在距中央一定距离的圆周上等距离接4块直径为6mm土壤纯化菌株，记 录指示菌株生长直径，筛选出效果较好的菌株得到初筛菌株；

复筛：一块指示菌株置于PDA平板中央，在距中央一定距离的圆周上等距 离接2块初筛菌株，筛选出对指示菌株抑菌作用效果明显、稳定的生防菌株。

6.一种如权利要求1所述的防治核桃炭疽病的生防菌株在制备防治核桃炭 疽病菌剂方面的应用，其特征在于，将生防菌株接种于含牛肉浸膏的马铃薯葡 萄糖液体培养基中进行发酵，将发酵液进行离心，上清液用细菌过滤器过滤， 即得无菌滤液菌剂。

7.根据权利要求6所述的防治核桃炭疽病的生防菌株在制备防治核桃炭疽 病菌剂方面的应用，其特征在于，所述牛肉浸膏的含量的质量百分数为0.5％。

8.根据权利要求6或7所述的防治核桃炭疽病的生防菌株在制备防治核桃 炭疽病菌剂方面的应用，其特征在于，所述发酵温度为28℃，所述液体培养基 的pH值为7。

9.根据权要求6或7所述的防治核桃炭疽病的生防菌株在制备防治核桃炭 疽病菌剂方面的应用，其特征在于，所述无菌滤液菌剂抑菌处理温度为12-45℃。

10.根据权利要求9所述的防治核桃炭疽病的生防菌株在制备防治核桃炭 疽病菌剂方面的应用，其特征在于，所述无菌滤液菌剂抑菌处理温度为28-30℃。