[发明专利]一种产L-色氨酸基因工程菌及其构建方法与用途在审
| 申请号： | 201610021610.9 | 申请日： | 2016-01-13 |
| 公开（公告）号： | CN105543154A | 公开（公告）日： | 2016-05-04 |
| 发明（设计）人： | 吴涛;毛贤军;赵津津;王小霞 | 申请（专利权）人： | 廊坊梅花生物技术开发有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P13/22 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 065001 河北*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 色氨酸 基因工程 及其 构建 方法 用途 | ||
1.一种产L-色氨酸基因工程菌，其特征在于，磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统中 一个或多个基因被敲除或失活，且一个或多个以非PEP为底物的葡萄糖转运蛋白或酶相关 基因被过表达。
2.如权利要求1所述基因工程菌，其特征在于，所述被敲除或失活的基因为ptsH和/或 ptsI和/或crr。
3.如权利要求1所述基因工程菌，其特征在于，所述被过表达的基因为glf和glk基因。
4.如权利要求1所述基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌保藏在中国微生物菌种 保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.11940。
5.权利要求1所述产L-色氨酸基因工程菌的构建方法，其特征在于，包括：
步骤A、L-色氨酸生产菌PTS系统中一个或多个与葡萄糖磷酸化和转运相关的基因被敲 除或失活，获得突变菌株；
步骤B、L-色氨酸生产菌中一个或多个以非PEP为底物的葡萄糖转运蛋白或酶相关的基 因被过表达，获得重组载体；
步骤C、将步骤B重组载体转化步骤A突变菌株中即得。
6.如权利要求5所述构建方法，其特征在于，所述被敲除或失活的基因为ptsH和/或 ptsI和/或crr。
7.如权利要求5所述构建方法，其特征在于，所述被过表达的基因为glf和glk基因。
8.权利要求1所述产L-色氨酸基因工程菌在L-色氨酸生产中的应用。
9.一种L-色氨酸的生产方法，其特征在于，将保藏编号为CGMCCNo.11940的产L-色氨 酸基因工程菌接种于四环素抗性的种子培养基进行扩繁，然后将扩繁后的培养物转入含四 环素抗性的发酵培养基发酵。
10.根据权利要求9所述生产方法，其特征在于，所述发酵培养基由60g/L葡萄糖、1.0g/ L酵母提取物、5g/LKH2PO4、2.0g/L柠檬酸、2g/LMgSO4·7H2O、5g/L(NH4)2SO4、0.1g/L MnSO4、0.1g/LFeSO4·7H2O、0.1g/LZnSO4·H2O、0.1g/LCoCl2·6H2O、0.03g/LCuSO4· 5H2O、20g/LCaCO3组成，pH值为7.0。
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