[发明专利]棘白菌素B的提取纯化方法

权利要求书

1.一种棘白菌素B的提取纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、酸化棘白菌素B的发酵液，过滤获得菌丝体滤液；

步骤二、将步骤一得到的菌丝体滤液通过以浓缩分离超滤膜为组件的超滤设备，调节 温度为25～30℃，压力为1.1～1.9MPa，流速为3.0～5.0L/h进行浓缩，得到分离后的透过 液；

步骤三、将步骤二得到的透过液通过以钠滤膜为组件的超滤设备，调节温度为 25～30℃，压力为1.1～1.9MPa，流速为1.0～3.0L/h进行浓缩，得到浓缩液；

步骤四、用凝胶柱将步骤三得到的浓缩液进行凝胶过滤层析，收集洗脱液，得到棘白 菌素B的粗品；

步骤五、将步骤四得到的棘白菌素B的粗品重结晶、加热回流和冷却干燥后，得到棘 白菌素B的纯品。

2.如权利要求1所述的棘白菌素B的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤一中， 棘白菌素B的发酵液用稀酸调节pH值为4.5～5.5，搅拌30～50min后，离心得到菌丝体， 然后在菌丝体中加入3～7倍体积的乙醇，搅拌1～5小时，过滤后获得菌丝体滤液。

3.如权利要求2所述的棘白菌素B的提取纯化方法，其特征在于，所述稀酸为稀盐 酸、稀硫酸、磷酸或醋酸中的任一种。

4.如权利要求3所述的棘白菌素B的提取纯化方法，其特征在于，所述稀酸为稀盐 酸。

5.如权利要求1所述的棘白菌素B的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤三中， 浓缩液中加入浓缩液1～4倍体积的乙醇，搅拌1～5小时，于-10～0℃下析出固体备用。

6.如权利要求1所述的棘白菌素B的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤四中， 将凝胶柱装柱后，先用体积比为1:1的甲醇和水进行一次洗脱，洗脱液回收，然后用体积 比为5:1～2:1的甲醇和水进行二次洗脱，流速为1.0～2.0L/h，收集洗脱液，将两次的洗脱 液回收置于20～50℃下浓缩至干，得到棘白菌素B的粗品。

7.如权利要求6所述的棘白菌素B的提取纯化方法，其特征在于，对凝胶柱进行二 次洗脱时，甲醇和水的体积比为3：1。

8.如权利要求1所述的棘白菌素B的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤五中， 向步骤四得到的棘白菌素B中加入6～10倍质量的重结晶溶剂，加热回流10～30min，冷却 降温到0～4℃，过滤，30～40℃下真空干燥得到棘白菌素B的纯品。

9.如权利要求8所述的棘白菌素B的提取纯化方法，其特征在于，所述重结晶溶剂 为丁酮、甲苯、乙酸乙酯或乙腈中的任一种。

10.如权利要求9所述的棘白菌素B的提取纯化方法，其特征在于，所述重结晶溶剂 为丁酮。