[发明专利]液态奶中低聚半乳糖含量的检测方法

权利要求书

1.液态奶中低聚半乳糖含量的检测方法，其特征在于，包括如 下步骤：

(1)采用与样品中添加的低聚半乳糖的品牌号相同的低聚半乳 糖作为标准物，配制成不同浓度的标准工作液；

(2)称取两份相同质量的样品，一份加入所述标准物，加水溶 解后配成加标液，另一份直接加水配成相同体积的样品液，将所述 加标液和所述样品液经预处理后连同所述工作液依次加至离子色谱 仪中进行梯度洗脱，并分别得到色谱图；

(3)将所述加标液和所述样品液的色谱图进行对比后筛选出用 于定量的特异峰，拟合得到所述工作液的标准曲线，再根据样品液 色谱图中特异峰的峰面积找出所述标准曲线上对应的浓度，得到液 态奶中低聚半乳糖含量。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2) 中，所述梯度洗脱的步骤中，所用的流动相包括超纯水、 250-260mmol/LNaOH溶液、1.0-1.2mol/LCH₃COONa溶液加 100-120mmol/LNaOH溶液组成的混合溶液和100-120mmol/L CH₃COONa溶液。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，步骤(2) 中，所述梯度洗脱的步骤中，洗脱时间为60～65min，流动相的流速 为0.40～0.45mL/min，且所述超纯水的体积分数为0-58％，所述NaOH 溶液的体积分数为0-100％，所述混合溶液的体积分数为0-100％， 所述CH₃COONa溶液的体积分数为0-45％。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2) 中，所述离子色谱仪的分析柱为3mm×150mmDionexCarboPac PA20，保护柱为3mm×30mmDionexCarboPacPA20。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述分析柱 的柱温为30-35℃。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2) 中，所述预处理的步骤具体包括：

加入相同体积的乙腈，混匀后经高速离心获得上清液，依次取 相同体积的所述加标液和所述样品液的上清液，加入等量水稀释后 再过滤，收集滤液。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述高速离 心的步骤中，离心温度为25-28℃，转速为9000-10000rpm，且离心 时间为10-13分钟。

8.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述过滤的 步骤具体包括：

将稀释后的上清液依次通过0.22μm的PES滤膜。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(3) 中，当存在1个以上的特异峰时，分别测得所述工作液在每个特异 峰处的标准曲线，后根据所述样品液中相应特异峰的峰面积，一一 找出相应标准曲线上对应的浓度，取所有浓度的平均值作为所述样 品液中低聚半乳糖的浓度。

10.根据权利要求1～9任一项所述的检测方法，其特征在于， 步骤(3)中，所述将所述加标液和所述样品液的色谱图进行对比后 筛选出用于定量的特异峰的步骤具体包括：

将所述加标液和所述样品液的色谱图进行对比，选择保留时间 和峰形相同且所述加标液的峰面积大于所述样品液的峰面积的色谱 峰作为定量的特异峰。