[发明专利]快速检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-RPA检测试剂盒及其用途有效
| 申请号： | 201610029446.6 | 申请日： | 2016-01-15 |
| 公开（公告）号： | CN105567871B | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 杨洋;张志东;秦晓东 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;马鑫 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 快速 检测 致病性 繁殖 呼吸 综合征 病毒 rt rpa 试剂盒 及其 用途 | ||
1.一种用于快速检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-RPA检测试剂盒，其特征在于包括有一对引物和一条探针，
其中，所述的一对引物和一条探针的序列如下所示：
上游引物：5’-AGCTGATGACACCTTTGAGTGGGTCGGCACCAGTT-3’
下游引物：5’-CGTCTGTGAGGACGCAGACAAATCCAGAGGCTCAT-3’
探针：5’-GTCGGCACCAGTTCCTGCACCGCGTAGAAC
-FAM-dT-THF-BHQ1-dT-GACAACAACGCTGAC-P-3’。
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述试剂盒中还包括水解缓冲液，醋酸镁以及ddH2O。
3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于用于检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒时，实验体系如下：13.75μL的水解缓冲液，1.05μL的10μM上游引物，1.05μL的10μM下游引物，0.075μL的10μM探针，2μL的病毒RNA模板，4.825μL的ddH2O以及1.25μL的280mM醋酸镁；
扩增反应在温度设定为40-42℃的实时荧光定量PCR仪中进行，反应时间为20min-1h，结束后通过Mx3005P软件对结果进行分析。
4.权利要求1-3任一项所述的试剂盒在制备检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒试剂中的用途。
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