[发明专利]利用SAMcell芯片检测物质对细胞增殖影响的方法在审
申请号: | 201610031148.0 | 申请日: | 2016-01-18 |
公开(公告)号: | CN105463119A | 公开(公告)日: | 2016-04-06 |
发明(设计)人: | 张函槊;李娟 | 申请(专利权)人: | 苏州吉诺瑞生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/06;G01N33/68 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 215123 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 samcell 芯片 检测 物质 细胞 增殖 影响 方法 | ||
1.利用SAMcell芯片检测或辅助检测待测物质对细胞增殖影响的方法,包括:
1)将待测物质与明胶溶液孵育或将所述待测物质与所述明胶溶液和转染试剂孵育,得到待测转染复合物;将对照物质与所述明胶溶液孵育或将所述对照物质与所述明胶溶液和所述转染试剂孵育,得到对照转染复合物;
所述明胶溶液由明胶、纤维连接蛋白和水组成,所述明胶溶液中明胶的质量百分含量为0.25%-0.4%,纤维连接蛋白的质量百分含量为0.01%;所述对照物质对细胞的增殖无影响;
2)将所述待测转染复合物固定到SAMcell芯片上,得到固定待测物质的芯片;将所述对照转染复合物固定到SAMcell芯片上,得到固定对照物质的芯片;
3)将细胞接种到所述固定待测物质的芯片和所述固定对照物质的芯片上,在相同条件下培养,分别得到固定待测物质的细胞培养芯片和固定对照物质的细胞培养芯片,将所述固定待测物质的细胞培养芯片和所述固定对照物质的细胞培养芯片分别命名为芯片1和芯片2;统计所述芯片1和所述芯片2上的细胞数目,确定所述待测物质对所述细胞增殖的影响:如所述芯片1上的细胞数目大于所述芯片2上的细胞数目,所述待测物质对所述细胞的增殖具有促进作用或候选具有促进作用;如所述芯片1上的细胞数目小于所述芯片2上的细胞数目,所述待测物质对所述细胞的增殖具有抑制作用或候选具有抑制作用;如所述芯片1上的细胞数目等于所述芯片2上的细胞数目,所述待测物质对所述细胞的增殖没有影响或候选没有影响。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述待测物质与所述对照物质均为siRNA、质粒、DNA片段、蛋白质、多肽或小分子化合物。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述待测物质为siRNA,所述待测物质与所述明胶溶液的比例为(1-5)μg:7.5μl。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述待测物质为蛋白质,所述待测物质与所述明胶溶液的比例为(1×10-3-1)ng:10μl。
5.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述待测物质为小分子化合物,所述待测物质与所述明胶溶液的比例为(1×10-3-1)μg:10μl。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法,其特征在于:步骤1)中所述孵育均在室温下进行;
和/或,所述转染试剂为Lipofectamine2000转染试剂。
7.根据权利要求1-6中任一所述的方法,其特征在于:步骤1)中所述孵育的时间为3-10分钟。
8.根据权利要求1-7中任一所述的方法,其特征在于:步骤2)中,所述将所述转染复合物固定到SAMcell芯片上包括将所述转染复合物点在用于固定所述转染复合物的区域;所述将所述对照转染复合物固定到SAMcell芯片上包括将所述对照转染复合物点在用于固定所述转染复合物的区域。
9.根据权利要求1-8中任一所述的方法,其特征在于:所述细胞为动物细胞或植物细胞。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:所述动物细胞为哺乳动物细胞。
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