[发明专利]一种交联红松籽源抗氧化肽磁性微球及其制备方法

权利要求书

1.一种交联红松籽源抗氧化肽磁性微球的制备方法，其步骤如下：

1)、在三颈瓶中加入摩尔浓度为1～5mol/L的对苯二酚100～200mL，搅拌均 匀后依次滴加1～5mL、质量分数35～40％的盐酸水溶液和10～20mL、质量分数 30～50％的甲醛水溶液；然后升温到70～80℃搅拌下反应1～2h，自然冷却至室温， 用缓冲液洗涤至中性，抽滤，除去滤液，将滤渣真空冷冻干燥后研磨得到凝胶；

2)、将30～50mL、摩尔浓度0.1～0.3mol/L的硫酸亚铁溶液和10～30mL、摩 尔浓度0.1～0.3mol/L的硫酸铁溶液混合，混合均匀后加入1～5g的步骤1)制备 的凝胶，然后升温至60～80℃，再滴加NaOH溶液使反应体系pH>11，反应1～2h 后，自然冷却至室温，用稀盐酸中和至中性，抽滤，除去滤液，将滤渣真空冷冻 干燥后研磨得到四氧化三铁磁性微球；

3)、向0.1～0.5g四氧化三铁磁性微球中加入10～20mL、浓度1～2mg/mL、 分子量为3～10kDa的红松籽源抗氧化肽水溶液，搅拌均匀后滴入10～20mL、质 量分数1％～10％的交联剂水溶液，于20～30℃摇床恒温交联，1～6h后停止震荡， 微球溶液用缓冲溶液洗涤至洗涤液中无肽，将微球溶液真空冷冻干燥后得交联红 松籽源抗氧化肽磁性微球。

2.如权利要求1所述的一种交联红松籽源抗氧化肽磁性微球的制备方法，其特 征在于：缓冲液为混合磷酸盐、Tris-HCl或甘氨酸-氢氧化钠。

3.如权利要求1所述的一种交联红松籽源抗氧化肽磁性微球的制备方法，其特 征在于：所述真空冷冻干燥，是将滤渣或微球溶液分装于冷冻盘中，厚度5～ 15mm，置于预冻温度为-75℃～-80℃冷冻库中，预冻时间为5～6h后；然后 再移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-60℃～-50℃，冻干时间为10～24h，研 磨后获得凝胶、四氧化三铁磁性微球或交联红松籽源抗氧化肽磁性微球。

4.如权利要求1所述的一种交联红松籽源抗氧化肽磁性微球的制备方法，其特 征在于：交联剂为甲醛、戊二醛、双醛淀粉或环氧化合物。

5.一种交联红松籽源抗氧化肽磁性微球，其特征在于：是由权利要求1～4任何 一项所述的方法制备得到。

6.如权利要求1所述的一种交联红松籽源抗氧化肽磁性微球，其特征在于：多 肽载量为90.3～116.7mg蛋白/g交联红松籽源抗氧化肽磁性微球，粒径范围为 473nm～1.1μm。