[发明专利]一种时间分辨荧光定量检测PCT的试剂盒

权利要求书

1.一种时间分辨荧光定量检测PCT的试剂盒，包括荧光微球抗体复合物 和免疫荧光试纸卡，其特征在于，

荧光微球抗体复合物：是将PCT单抗标记于稀土荧光微球形成的复合体， 将该复合体添加到枪头中并冻干而成，作为检测抗体；

免疫荧光试纸卡包括检测试纸卡，检测试纸卡由样品垫、硝酸纤维素膜和 吸水垫依次搭接并贴于衬板上构成；其中，硝酸纤维素膜上的检测线位置包被 有另一PCT单抗，质控线位置包被有羊抗小鼠多抗。

2.根据权利要求1所述的时间分辨荧光定量检测PCT的试剂盒，其特征 在于，所述复合体采用羧基化的稀土荧光微球作为载体，通过碳二亚胺和羟基 硫代琥珀酰亚胺将羧基活化，活化的羧基与PCT单抗中的-NH₂共价结合，形 成的荧光微球复合体。

3.根据权利要求2所述的时间分辨荧光定量检测PCT的试剂盒，其特征 在于，所述复合体的具体制备方法为：

(1)取稀土荧光微球，离心取沉淀，用pH6.0的MES缓冲液洗涤；

(2)活化：在洗涤后的微球中加入等体积等摩尔浓度的碳二亚胺和羟基 硫代琥珀酰亚胺，室温震荡进行羧基活化反应；

(3)标记抗体：步骤(2)活化后的微球离心取沉淀，用PB缓冲液洗涤 后加入适量PCT单抗，室温震荡使羧基与-NH₂的共价结合，实现抗体标记；

(4)将经过抗体标记的微球离心取沉淀，加入羟胺缓冲液淬灭反应；

(5)经过淬灭反应的微球离心取沉淀，加入封闭液进行封闭，最后加入 储存液保存；

所述封闭液为10mMPB溶液，其中含0.5wt％酪蛋白；

所述储存液为10mMPB溶液，其中含0.5wt％BSA，0.5％(v/v)Tween-20， 0.02wt％叠氮化钠。

4.根据权利要求1所述的时间分辨荧光定量检测PCT的试剂盒，其特征 在于，所述样品垫为经过含3wt％BSA的0.01MPB缓冲液封闭的玻璃纤维膜。

5.根据权利要求1所述的时间分辨荧光定量检测PCT的试剂盒，其特征 在于，所述检测线和质控线之间的距离为4mm。

6.根据权利要求5所述的时间分辨荧光定量检测PCT的试剂盒，其特征 在于，检测线与样品垫端的最短距离为7mm，质控线距离吸水垫的最短距离 为11mm。

7.根据权利要求1所述的时间分辨荧光定量检测PCT的试剂盒，其特征 在于，免疫荧光试纸卡是由检测试纸卡固定在塑料底卡上，试纸表面用面卡压 紧而成，且面卡在对应样品垫和硝酸纤维素膜的部位分别预留加样孔和观察 窗。

8.根据权利要求1所述的时间分辨荧光定量检测PCT的试剂盒，其特征 在于，还包括样品缓冲液，其为含有0.25wt％酪蛋白和40mMEDTA的PB溶 液。

9.根据权利要求1～8任一所述的时间分辨荧光定量检测PCT的试剂盒， 其特征在于，还包括稀释液，稀释液成分为含有6wt％BSA和5mM葡萄糖的 PB溶液。