[发明专利]枯草芽孢杆菌生物保鲜剂及在大黄鱼保鲜中的应用

权利要求书

1.一种枯草芽孢杆菌，其特征在于：所述的菌株为枯草芽孢杆菌BSh0851，保藏日期为 2009年12月13日，保藏单位是中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为 CGMCCNo.3502。

2.一种如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌在制备生物保鲜剂中的应用。

3.根据权利要求2所述的枯草芽孢杆菌生物保鲜剂，其特征在于：所述保鲜剂为枯草芽 孢杆菌粗提物稀释为活性物质量为0.3mg/mL，与0.3mg/mL尼萨普林和20mg/mL壳聚糖盐酸 盐制成混合保鲜剂。

4.根据权利要求2所述的枯草芽孢杆菌生物保鲜剂，其特征在于：枯草芽孢杆菌粗提物 的制备方法为：

（1）种子液制备：从营养琼脂斜面培养基上挑取一接种环已活化的枯草芽孢杆菌接种 到种子培养基中，37℃，200r/min，培养24h；种子培养基为牛肉膏3g、氯化钠5g、蛋白胨10g、 蒸馏水1000mL、pH7.0-7.2；

（2）发酵液培养基制备：酵母浸膏14g，无水葡萄糖14g，MgSO₄1g，蒸馏水1000mL，pH7.0；

（3）枯草芽孢杆菌无菌体发酵液的制备：在步骤（2）制得的发酵液中接入步骤（1）制得 的种子液，接种量为7%；调节初始pH值8；培养温度38℃，转速100r·min^-1，装液量150mL/ 250mL摇瓶；在此条件下培养24h；

（4）无菌发酵液的制备：将步骤（3）所述枯草芽孢杆菌培养液在10000r/min离心15min 后，用0.22μm滤膜过滤，即为无菌体的发酵滤液；

（5）发酵液粗提物制备：将步骤（4）所述无菌发酵液用2mol/L的HCl调至pH2.0，于4℃放 置3d，再次10000r/min离心10min，收集沉淀物，溶解于无菌水中，并用NaCl调节pH至7。

5.如权利要求2所述的枯草芽孢杆菌生物保鲜剂在大黄鱼防腐保鲜中的应用。

6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：大黄鱼保鲜方法是用碎冰将鲜活大黄鱼失 活，将枯草芽孢杆菌粗提物、尼萨普林、壳聚糖盐酸盐溶液混合喷洒在鱼体，每隔12h喷洒所 述生物保鲜剂，每尾大黄鱼每次喷洒的用量为5-10mL；于4℃冰箱内冰上贮藏。