[发明专利]一种从柑橘黄酮提取物中分离橘皮素和川陈皮素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种提取物分离技术领域，具体涉及的是一种从柑橘黄酮提取物中分离橘皮素和川陈皮素的方法。

背景技术

脂溶性柑橘生物类黄酮主要指的是柑橘类特有的多甲氧基类黄酮类(PMFs)，其具有比一般类黄酮更强的抗癌活性。多甲氧基黄酮类的配基如川陈皮素(nobiletin)、橘皮素(又叫红橘素，tangeretin)和甜橙黄酮(sinensetin)，尽管原料含量很低，但因为具有比一般类黄酮更强的生理活性，因而更加引人关注。目前，已明确它的抑制肿瘤效果要比一般类黄酮类要强得多，经考证，主要原因是多甲氧基类黄酮类呈脂溶性，更易于接近并浸透至肿瘤细胞而起作用。具体来说，川陈皮素(nobiletin)具有抗血细胞凝集、抗血栓形成、抗癌、抗真菌、抗炎、抗过敏、抗胆碱酯酶和抗癫痫作用，碳水化合物代谢促进剂；而橘皮素(tangeretin)具有抗真菌作用，体外可抑制亚性肿瘤细胞增殖，可抑制嗜碱性细胞组胺释放，对于平滑肌的收缩亦有抑制作用。由于两种成分的作用机理不一样，因此需要进行分离使用。

而在工业化使用中，对于多甲氧基黄酮来说，一般要求其单一成分含量大于95％。目前，多数厂家均是使用柑橘(Citrus aurantium L.)自然生理落果，然后经乙醇提取、树脂分离、乙醇再精制的方法进行加工生产，提取物是多甲氧基黄酮混合物，提取物的含量在50％以内，且还需要通过树脂吸附分离才达到50％，要想得到单一成分高含量(>95％)，还需要多种有机溶剂进行多次分离精制才能达到。因此，其生产过程非常复杂，生产成本极高，难以实现大批量生产，并且因为是混合物，因而质量上也难以得到市场认可。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明提供了一种从柑橘黄酮提取物中分离橘皮素和川陈皮素的方法，其可实现多甲氧基黄酮单一成分(橘皮素和川陈皮素)的分离，并且所分离的单一成分含量均大于95％。

为实现上述目的，本发明基于同一发明构思下，分别提供了从柑橘黄酮提取物中分离橘皮素和川陈皮素的方法，如下所述：

分离橘皮素的方法

其包括以下步骤：

(1)将枳实或陈皮粉碎，得到粉碎原料，然后加入浓度为30～50％的第一有机溶剂，并于80～90℃的回流条件下，对粉碎原料进行回流提取2～3h，得到提取液；其中，所述第一有机溶剂的体积与粉碎原料的质量比为3～5:1；

(2)再次加入浓度为30～50％的第一有机溶剂混合，然后再于80～90℃的回流条件下，对粉碎原料进行提取2～3h，得到二次提取液，并与第一次提取液进行合并；其中，再次加入的第一有机溶剂的体积与粉碎原料的质量比为3～5:1；

(3)回收提取液，得到质量为粉碎原料质量0.2倍的柑橘黄酮混合物粗浸膏；

(4)将粗浸膏与清水混合均匀，粗浸膏与清水体积比为1∶1，得到混合液，然后加入混合液10～15倍体积的第二有机溶剂，并于室温条件下搅拌、萃取2～3h，得到水层及有机层；

(5)分出水层及有机层，并将有机层液回收，得到质量为粉碎原料质量0.1倍的浸膏；

(6)在浸膏中加入浓度为50％～70％的第三有机溶剂进行溶解，然后加入活性炭；所述第三溶剂和活性炭的质量分别为浸膏质量的5～8倍和0.2～0.4倍；

(7)于75～85℃的回流条件下，对混合物进行提取2～3h，获得的提取液经冷却、过滤后，得到滤液及活性炭滤渣，然后对滤液进行真空浓缩，得到二次浸膏；

(8)在二次浸膏中加入浓度为90％～95％的乙醇进行回流溶解，并过滤，所得滤液经冷却、结晶、二次过滤、干燥后得到橘皮素；所述乙醇的质量为二次浸膏质量的3～5倍。

作为优选，所述第一有机溶剂为甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮和正丁醇中的任意一种；所述第二有机溶剂为乙酸乙酯、石油醚、丙酮和正丁醇中的任意一种；所述第三有机溶剂为甲醇或乙醇。

分离川陈皮素的方法

其包括以下步骤：

(1)将枳实或陈皮粉碎，得到粉碎原料，然后加入浓度为30～50％的第一有机溶剂，并于80～90℃的回流条件下，对粉碎原料进行回流提取2～3h，得到提取液；其中，所述第一有机溶剂的体积与粉碎原料的质量比为3～5:1；

(2)再次加入浓度为30～50％的第一有机溶剂混合，然后再于80～90℃的回流条件下，对粉碎原料进行提取2～3h，得到二次提取液，并与第一次提取液进行合并；其中，再次加入的第一有机溶剂的体积与粉碎原料的质量比为3～5:1；