[发明专利]T-2毒素的检测方法及检测试剂盒

权利要求书

1.一种T-2毒素的检测方法，其特征是，该方法包括如下步骤：

（A）T-2毒素核酸适体与单链信号探针DNA（ssDNA）杂交，形成杂交链；

（B）使该杂交链与待测样品作用，当待测样品中有T-2毒素存在时，杂交链选择性地与T-2毒素反应释放出单链信号探针ssDNA；

（C）消除杂交链的干扰，利用DNA扩增，使杂交链成双链DNA，然后用外切酶，将双链DNA水解成单核苷酸而除去双链DNA，留下单链信号探针ssDNA；

（D）利用T-2毒素核酸适体-T-2毒素结合体不能诱导银离子还原生成近红外荧光银纳米簇，只有单链信号探针ssDNA能够诱导银离子还原成近红外荧光银纳米簇，检测体系的荧光强度，从而测定待测样品中的T-2毒素的含量；

所述T-2毒素核酸适体为5’-CAGCTCAGAAGCTTGATCCTGTATATCAAGCATCGCGTGTTTACACATGCGAGAGGTGAAGACTCGC-3’；所述的单链信号探针ssDNA为5’-CCCCCCACACCCGATCCCCCCCGCGAGTCTTCACC-3’。

2.一种检测T-2毒素的试剂盒，其特征是，其至少包括： T-2毒素核酸适体、可与T-2毒素核酸适体杂交的单链信号探针ssDNA、DNA扩增体系、核酸外切酶、银离子还原检测体系。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征是，所述T-2毒素核酸适体为5’-CAGCTCAGAAGCTTGATCCTGTATATCAAGCATCGCGTGTTTACACATGCGAGAGGTGAAGACTCGC-3’。

4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征是，所述的单链信号探针DNA为5’-CCCCCCACACCCGATCCCCCCCGCGAGTCTTCACC-3’。

5.根据权利要求2中所述的检测T-2毒素的试剂盒，其特征是，所述DNA扩增体系包括缓冲溶液、dNTP和Phi29 DNA 聚合酶；所述缓冲溶液由Tris-HCl、MgCl₂、 (NH₄)₂SO₄组成。

6.根据权利要求2中所述的检测T-2毒素的试剂盒，其特征是，所述核酸外切酶为ExoIII核酸外切酶。

7.根据权利要求2中所述的检测T-2毒素的试剂盒，其特征是，所述的银离子还原检测体系中还原剂为硼氢化物。

8.根据权利要求7中所述的检测T-2毒素的试剂盒，其特征是，所述硼氢化物为硼氢化钠。