[发明专利]黄曲霉毒素M1的快速检测方法

权利要求书

1.一种黄曲霉毒素M1的快速检测方法，其特征是，该方法包括如下步骤：

（A）黄曲霉毒素M1核酸适体Apt与单链信号探针ssDNA杂交，形成杂交链；

（B）使该杂交链与待测样品作用，当待测样品中有黄曲霉毒素M1存在时，杂交链选择性 地与黄曲霉毒素M1反应释放出单链信号探针DNA；

（C）消除杂交链的干扰，利用DNA扩增，使杂交链成双链DNA，然后用外切酶，将双链DNA 水解成单核苷酸，从而除去双链DNA，留下单链信号探针ssDNA；

（D）利用黄曲霉毒素M1核酸适体-黄曲霉毒素M1结合体不能诱导铜离子还原成近红外 荧光铜纳米簇，只有单链信号探针ssDNA能够诱导铜离子还原生成强荧光的近红外铜纳米 簇的原理，检测体系荧光强度，从而测定待测样品中的真菌毒素黄曲霉毒素M1的含量。

2.根据权利要求1所述的黄曲霉毒素M1的快速检测方法，其特征是，所述黄曲霉毒素M1 核酸适体为5′-ACTGCTAGAGATTTTCCACAT-3′。

3.根据权利要求1或2所述的黄曲霉毒素M1的快速检测方法，其特征是，所述的单链信 号探针DNA为5’-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTATGTGGAAAATCTCTA- 3’。

4.权利要求1所述的黄曲霉毒素M1的快速检测方法，还包括检测黄曲霉毒素M1的试剂 盒，其至少包括：黄曲霉毒素M1核酸适体、单链信号探针DNA、DNA扩增体系、外切酶、铜离子 还原检测体系。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征是，所述黄曲霉毒素M1核酸适体为5′- ACTGCTAGAGATTTTCCACAT-3′。

6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征是，所述的单链信号探针DNA为5’- TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTATGTGGAAAATCTCTA-3’。

7.根据权利要求4中所述的试剂盒，其特征是，所述DNA扩增体系包括缓冲溶液、dNTP 和Phi29DNA聚合酶;所述缓冲溶液由Tris-HCl、MgCl₂、(NH₄)₂SO₄组成。

8.根据权利要求4中所述的试剂盒，其特征是，所述核酸外切酶为ExoIII核酸外切 酶。

9.根据权利要求4中所述的试剂盒，其特征是，所述的铜离子还原检测体系中的还原剂 为维生素C。