[发明专利]赭曲霉毒素A的快速检测方法

权利要求书

1.一种赭曲霉毒素A的快速检测方法，其特征是，该方法包括如下步骤：

（A）使赭曲霉毒素A核酸适体（Apt）和可与赭曲霉毒素A核酸适体杂交的单链信号探针 DNA（ssDNA）杂交，形成杂交链；

（B）使该杂交链与待测样品作用，当待测样品中有赭曲霉毒素A存在时，杂交链选择性 地与赭曲霉毒素A反应释放出单链信号探针ssDNA；

（C）为了消除杂交链的干扰，利用DNA扩增，使杂交链成双链DNA，然后用外切酶，选择性 地将双链DNA水解成单核苷酸，留下单链信号探针ssDNA；

（D）利用赭曲霉毒素A核酸适体-赭曲霉毒素A结合体不能诱导铜离子还原生成近红外 荧光的铜纳米粒子，只有单链信号探针ssDNA能够诱导铜离子还原成近红外荧光铜纳米粒 子，检测体系的荧光强度，从而测定待测样品中的赭曲霉毒素A的含量。

2.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素A的检测方法，其特征是，所述赭曲霉毒素A核酸适 体为5’-GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACAC-3’。

3.根据权利要求1或2所述的赭曲霉毒素A的检测方法，其特征是，所述的单链信号探针 ssDNA为5’-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTGTGTCCCATGCTCC- 3’。

4.一种赭曲霉毒素A的快速检测方法，还提供检测赭曲霉毒素A的试剂盒，其特征是，其 至少包括：赭曲霉毒素A核酸适体、可与赭曲霉毒素A核酸适体杂交的单链信号探针ssDNA、 DNA扩增体系、核酸外切酶、铜离子还原检测体系。

5.根据权利要求4所述的检测赭曲霉毒素A的试剂盒，其特征是，所述赭曲霉毒素A核酸 适体为5’-GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACAC-3’。

6.根据权利要求4或5所述的检测赭曲霉毒素A的试剂盒，其特征是，所述的单链信号探 针DNA为5’-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTGTGTCCCATGCTCC- 3’。

7.根据权利要求4所述的检测赭曲霉毒素A的试剂盒，其特征是，所述DNA扩增体系包括 缓冲溶液、三磷酸脱氧单核苷酸混合物dNTP和Phi29DNA聚合酶；所述缓冲溶液由Tris- HCl、MgCl₂、(NH₄)₂SO₄组成。

8.根据权利要求4所述的检测赭曲霉毒素A的试剂盒，其特征是，所述核酸外切酶为Exo III核酸外切酶。

9.根据权利要求4所述的检测赭曲霉毒素A的试剂盒，其特征是，所述的铜离子还原检 测体系中还原剂为抗坏血酸。

10.一种可用于检测赭曲霉毒素A的赭曲霉毒素A核酸适体，其特征是，其碱基序列为 5’-GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACAC-3’。