[发明专利]用于检测黄曲霉毒素的单克隆抗体及酶联免疫方法与试剂盒有效
| 申请号： | 201610051042.7 | 申请日： | 2016-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN105524168B | 公开（公告）日： | 2020-05-01 |
| 发明（设计）人： | 袁宗辉;陶燕飞;彭大鹏;杨碧嘉;王玉莲;潘源虎;陈冬梅 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C07K16/14 | 分类号： | C07K16/14;C12N5/20;G01N33/577;C12R1/91 |
| 代理公司： | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人： | 徐绍新 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 黄曲霉 毒素 单克隆抗体 免疫 方法 试剂盒 | ||
【权利要求书】：
1.一种非诊断目的检测黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的酶联免疫方法，包括以下步骤：
1)将黄曲霉毒素B2肟与牛血清白蛋白偶联得到包被原；
2)将包被原稀释成0.33μg/mL后包被固相载体；
3)用保藏号为CCTCC NO:C201558的杂交瘤细胞株AFB1/3B9制备单克隆抗体；
4)将单克隆抗体稀释35000倍，制成单克隆抗体工作液；
5)样品处理：准确称取饲料样品1±0.05g于50mL离心管中，加入4mL乙腈、1mL丙酮，混合均匀，4000r/min离心5min，取上清1mL吹干，加入2mL的PBS缓冲液溶解，作为待测样品溶液；
6)向固相载体中加入待测样品溶液和单克隆抗体工作液；
7)加入辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG抗体工作液；
8)加入底物液，反应终止后用酶标仪在450nm处测定光密度值并计算含量。
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