[发明专利]紫变青霉QL-9204及在转化根皮苷制备根皮素中的应用有效
申请号: | 201610051127.5 | 申请日: | 2016-01-25 |
公开(公告)号: | CN105543108B | 公开(公告)日: | 2019-03-05 |
发明(设计)人: | 梅建凤;李靓;金航;应国清;王鸿;易喻 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P7/26;C12R1/80 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 青霉 ql 9204 转化 根皮苷 制备 根皮素 中的 应用 | ||
1.紫变青霉(Penicillium purpurogenum)QL-9204,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号:CCTCC No:M 2015781,保藏日期2015年12月25日,地址:中国,武汉,武汉大学;邮编:430072。
2.一种权利要求1所述紫变青霉QL-9204在生物转化根皮苷制备根皮素中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述的应用是以紫变青霉QL-9204经产酶培养后的发酵液抽滤获得的滤液为催化剂,以根皮苷为底物,以甲醇为助溶剂构成转化体系,在28~30℃、200~250r/min条件下进行转化反应,转化反应结束后,将转化液分离纯化,获得根皮素。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述底物根皮苷的终浓度为20~80mg/L转化体系。
5.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述助溶剂甲醇的体积终浓度为2~8ml/L转化体系。
6.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述催化剂用量以抽滤前发酵液中干菌体重量计为2.5~6.0g/L转化体系。
7.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述紫变青霉QL-9204产酶培养方法为:(1)活化培养:将紫变青霉QL-9204菌种孢子接种于斜面培养基,于28~30℃恒温培养2~3天,获得斜面孢子,所述的斜面培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基;(2)种子扩大培养:挑取步骤(1)活化培养后紫变青霉QL-9204斜面孢子接种至种子培养基中,于28~30℃、200~250r/min振荡条件下培养2~3天,得种子液,所述种子培养基为马铃薯葡萄糖培养基;(3)产酶培养:将种子液以体积浓度5~8%的接种量接种至发酵培养基中,于28℃、200r/min恒温振荡条件下培养5天,获得发酵液;所述发酵培养基组成为:蔗糖2~5g/L,(NH4)2SO4 4~6g/L,NaCl 5g/L,KH2PO4 5g/L,MgSO4 1g/L,MnSO4 1g/L,溶剂为水,pH 6~7。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于所述发酵培养基组成为:蔗糖2g/L,(NH4)2SO46g/L,NaCl 5g/L,KH2PO4 5g/L,MgSO4 1g/L,MnSO4 1g/L,溶剂为水,pH为6。
9.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述分离纯化的方法为:在生物转化反应结束后,转化体系用等体积的乙酸乙酯萃取3次,合并萃取液于圆底烧瓶中,45℃下减压蒸干乙酸乙酯后,再加入等同原转化体系体积的甲醇溶解残留物;甲醇溶液用滤纸过滤后,转入另一洁净圆底烧瓶中,45℃下减压蒸干甲醇后,加少量甲醇溶解残留物,甲醇溶液转入洁净烧杯中,减压干燥后即得根皮素。
10.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述转化反应的条件为:在28~30℃、200~250r/min恒温振荡条件下转化8~15h。
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