[发明专利]一种水中磺胺嘧啶生物毒性的检测方法有效
申请号: | 201610055069.3 | 申请日: | 2016-01-27 |
公开(公告)号: | CN105606735B | 公开(公告)日: | 2018-10-16 |
发明(设计)人: | 刘开林;柏连阳;周小毛;刘祥英;罗坤;胡利锋;刘敏 | 申请(专利权)人: | 湖南农业大学;湖南省农业生物技术研究中心 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/08 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 410128 湖南省长沙市*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 水中 磺胺 嘧啶 生物 毒性 检测 方法 | ||
1.一种水中磺胺嘧啶生物毒性的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)浓度效应方程的建立
A、将磺胺嘧啶配制成不同浓度的标准溶液,在其中培养评价水体毒性的模式生物,并测试模式生物的受抑制率;
B、通过三相中空纤维液相微萃取技术提取标准溶液中的磺胺嘧啶,并对其浓度进行测定,得到培养模式生物的标准溶液中磺胺嘧啶的浓度;
C、根据所述模式生物的受抑制率和所述磺胺嘧啶的浓度建立浓度效应方程;
2)磺胺嘧啶的生物毒性的检测
D、采用三相中空纤维液相微萃取技术提取样品中的磺胺嘧啶,并对其浓度进行测定;
E、根据所述浓度效应方程计算所述样品中磺胺嘧啶对所述模式生物的抑制率;所述三相中空纤维液相微萃取过程中选择聚丙烯中空纤维;所述三相中空纤维液相微萃取中接受相为pH 8~12的碱性溶液;
所述三相中空纤维液相微萃取中有机溶剂为正辛醇或甲苯;
所述三相中空纤维萃取的过程中选择静态模式,将所述中空纤维在溶液中静置5~8h;所述磺胺嘧啶浓度的检测采用高效液相色谱法,其检测条件为:色谱柱4.6mm×150mm,ZORBAX SB-C18,粒径5μm;流动相甲醇:水=30:70,所述水中含有0.2~0.4%乙酸;流速:0.7~0.9mL/min;检测波长266nm;进样量10μL;柱温28~32℃。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述模式生物为大型溞。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)浓度效应方程的建立
A、将磺胺嘧啶配制成不同浓度的标准溶液,在其中培养大型溞,并测试大型溞的受抑制率;
B、在聚丙烯中空纤维表面形成正辛醇有机液膜,在聚丙烯中空纤维内腔注入pH 10~12的碱性溶液作为接受相,将所述聚丙烯中空纤维浸于培养大型溞的磺胺嘧啶标准液中6~7h,收集提取磺胺嘧啶;采用高效液相色谱法对所提取的磺胺嘧啶的浓度进行测定,高效液相色谱的检测条件为:色谱柱4.6mm×150mm,ZORBAX SB-C18,粒径5μm;流动相甲醇:水=30:70,所述水中含有0.2~0.4%乙酸;流速:0.7~0.9mL/min;检测波长266nm;进样量10μL;柱温28~32℃;
C、根据所述模式生物的受抑制率和所述磺胺嘧啶的浓度建立浓度效应方程;
2)磺胺嘧啶的生物毒性评价
D、对聚丙烯中空纤维进行如步骤1)所述的处理后,收集提取样品中的磺胺嘧啶,并采用步骤1)中所述的方法对其浓度进行测定;
E、根据所述浓度效应方程计算所述样品中磺胺嘧啶对大型溞的抑制率。
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