[发明专利]一种水中磺胺嘧啶生物毒性的检测方法有效
申请号: | 201610055069.3 | 申请日: | 2016-01-27 |
公开(公告)号: | CN105606735B | 公开(公告)日: | 2018-10-16 |
发明(设计)人: | 刘开林;柏连阳;周小毛;刘祥英;罗坤;胡利锋;刘敏 | 申请(专利权)人: | 湖南农业大学;湖南省农业生物技术研究中心 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/08 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 410128 湖南省长沙市*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 水中 磺胺 嘧啶 生物 毒性 检测 方法 | ||
本发明涉及一种水中磺胺嘧啶生物毒性的检测方法,包括如下步骤:1)浓度效应方程的建立2)磺胺嘧啶的生物毒性的检测。本发明所述的方法采用三相中空纤维液相微萃取技术富集溶液中的可电离化合物,可较为准确地测定不同环境条件下对生物实际起作用的磺胺嘧啶的浓度,进一步准确的预测可电离化合物的生物毒性。
技术领域
本发明涉及水环境中有机污染物风险评价领域,具体涉及一种检测水中磺胺嘧啶生物毒性的方法。
背景技术
环境pH对可电离有机化合物的毒性和富集效应具有非常显著的影响,相同浓度的化合物在不同pH条件下毒性和生物富集显著不同,从而影响这些化合物的风险评价。然而目前针对不同pH条件下毒性不同只能通过生物测定来确定或者部分根据pH和电离常数进行估算,生物测定耗时费力,估算准确性差而且不实用。直接根据化学方法测定浓度评价毒性具有快速,准确的优势,但因为毒性随pH变化,目前还没有一种评价可电离的有机化合物的生物有效性的化学方法。因此,开发一种能直接测定对水生生物有效浓度的化学方法,建立能获得对不同pH条件下的可电离化合物生物毒性评价方法,对可电离化合物生态风险评价和控制水污染具有重要的现实意义。
发明内容
(一)要解决的技术问题
针对现有技术中存在的无法在不同的pH环境中根据添加浓度准确地评价磺胺嘧啶的生物毒性的缺陷,本发明提供一种检测水中磺胺嘧啶的生物毒性的方法。
(二)技术方案
本发明所述的磺胺嘧啶生物毒性的检测方法,包括如下步骤:
1)浓度效应方程的建立
A、将磺胺嘧啶配制成不同浓度的标准溶液,在其中培养评价水体毒性的模式生物,并测试模式生物的受抑制率;
B、通过三相中空纤维液相微萃取技术收集提取标准溶液中的磺胺嘧啶,并对其浓度进行测定,得到培养模式生物的标准溶液中磺胺嘧啶的浓度;
C、根据所述模式生物的受抑制率和所述磺胺嘧啶的浓度建立浓度效应方程;
2)磺胺嘧啶的生物毒性的检测
D、采用三相中空纤维液相微萃取技术收集提取样品中的磺胺嘧啶,并对其浓度进行测定;
E、根据所述浓度效应方程计算所述样品中磺胺嘧啶对所述模式生物的抑制率。
本发明中,所述三相中空纤维液相微萃取过程中选择聚丙烯中空纤维;
具体的,本发明选择Q3/2聚丙烯中空纤维(内径600μm,壁厚200μm,孔径0.2μm,孔率75%)。
本发明中,所述三相中空纤维液相微萃取中接受相为pH 8~12的碱性溶液。
本发明中,所述三相中空纤维液相微萃取中有机溶剂为正辛醇或甲苯。
本发明中,所述三相中空纤维萃取的过程中选择静态模式,将所述中空纤维在溶液中静置5~8h。
本发明中,所述磺胺嘧啶浓度的检测采用高效液相色谱法,其检测条件为:色谱柱4.6mm×150mm,ZORBAX SB-C18,粒径5μm;流动相甲醇:水=30:70,所述水中含有0.2~0.4%乙酸;流速:0.7~0.9mL/min;检测波长266nm;进样量10μL;柱温28~32℃。
本发明中,所述模式生物可选择任何用于测试水体毒性的小型水生生物。
本发明中优选为大型溞,大型溞具有生活周期短、繁殖快、经济、方便易得、对毒物敏感和易于在实验室培养等优点,应用于本实验中,可方便快捷地得到结果。
优选的,本发明所述的方法,包括如下步骤:
1)浓度效应方程的建立
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