[发明专利]一种同时检测金匮肾气片中五种有效成分含量的方法

权利要求书

1.一种同时检测金匮肾气片中五种有效成分含量的方法，其特征在于：所述有效成分为马钱苷、京尼平甘酸、毛蕊花糖苷、桂皮醛和丹皮酚，所述方法为高效液相色谱法，所述色谱条件为：

反相色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；进样量：10μl；

流动相：流动相A：乙腈、流动相B：体积百分比为0.1％的磷酸水溶液，流动相A的体积百分比与流动相B的体积百分比的和始终保持为100％，进行线性梯度洗脱，所述线性梯度洗脱、波长与流速如下：

梯度1---0～15min，流动相A与流动相B的体积百分比为(10～20％)∶(90～80％)，流速为1.0ml/min，检测波长为230～245nm；

梯度2---15～30min，流动相A与流动相B的体积百分比为〔(10～20％)→(65～40％)〕∶〔(90～80％)→(35～60％)〕，流速为1.0ml/min，检测波长为230～245nm；

梯度3---30～55min，流动相A与流动相B的体积百分比为(40～65％)∶(60～35％)，流速为1.0～1.2ml/min，检测波长为284～294nm。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述线性梯度洗脱、波长与流速如下：

梯度1---0～15min，流动相A与流动相B的体积百分比为15％∶85％，流速为1.0ml/min，检测波长为240nm；

梯度2---15～30min，流动相A与流动相B的体积百分比为(15％→55％)∶(85％→45％)，流速为1.0ml/min，检测波长为240nm；

梯度3---30～55min，流动相A与流动相B的体积百分比为55％_∶45％，流速为1.2ml/min，检测波长为286nm。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述线性梯度洗脱、波长与流速如下：

梯度1---0～15min，流动相A与流动相B的体积百分比为10％∶90％，流速为1.0ml/min，检测波长为235nm；

梯度2---15～30min，流动相A与流动相B的体积百分比为(10％→65％)∶(90％→30％)，流速为1.0ml/min，检测波长为245nm；

梯度3---30～55min，流动相A与流动相B的体积百分比为65％∶35％，流速为1.2ml/min，检测波长为294nm。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述线性梯度洗脱中梯度3后面还可以添加一个过渡梯度，所述过渡梯度的流动相比例与所述梯度1相同，并冲洗至基线平稳。

5.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于还包括所述金匮肾气片的前处理方法，所述金匮肾气片的前处理方法为：取金匮肾气片供试品除去包衣，研细，所得细粉能通过100目筛，取所述细粉1.8～2.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积百分比为80％的甲醇25ml，称定重量，45℃下浸泡1.5小时，超声15min后放至室温，再称定重量，用体积百分比为80％的甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液。

6.一种同时检测金匮肾气片中五种有效成分含量的方法，其特征在于：所述有效成分为马钱苷、京尼平甘酸、毛蕊花糖苷、桂皮醛和丹皮酚，所述方法为高效液相色谱法，所述色谱条件为：

反相色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；进样量：10μl；

流动相：流动相A：乙腈、流动相B：体积百分比为0.1％的磷酸水溶液，流动相A的体积百分比与流动相B的体积百分比的和始终保持为100％，进行线性梯度洗脱，所述线性梯度洗脱、波长与流速如下：

梯度1---0～35min，流动相A与流动相B的体积百分比为〔(5～15％)→(65～45％)〕∶〔(95～85％)→(35～55％)〕，流速为1.0～1.2ml/mm，检测波长为230～245nm；

梯度2---35～65min，流动相A与流动相B的体积百分比为(40～65％)∶(60～35％)，流速为1.0～1.2ml/min，检测波长为284～294nm。