[发明专利]脊椎动物源性成分的通用PCR检测引物及检测方法有效
| 申请号： | 201610061006.9 | 申请日： | 2016-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN105525014B | 公开（公告）日： | 2018-09-18 |
| 发明（设计）人： | 薄清如;罗宝正;赵福振;邵建宏;陈轩;姚丽锋;彭玉芬;陈敬 | 申请（专利权）人： | 珠海出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 谭志强 |
| 地址： | 519015 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 脊椎动物 成分 通用 pcr 检测 引物 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于检测脊椎动物源性成分的通用PCR引物对，其特征在于，所述引物对是根据脊椎动物门线粒体DNA的共有序列设计的；
所述引物对的核苷酸序列如下所示：
F-primer：5’-TGTTTACCAAAAACATCACCTCCA-3’；
R-primer：5’-AGTTAAAGCTCCATAGGGTCT-3’。
2.一种脊椎动物源性成分的PCR检测方法，包括如下步骤：
(1)提取样品DNA作为扩增模板，脊椎动物源性样品DNA为阳性对照；
(2)以权利要求1所述的引物对进行PCR扩增；
(3)对PCR产品进行凝胶电泳，根据电泳结果判断样品中是否含有脊椎动物源性成分。
3.根据权利要求2所述的脊椎动物源性成分的PCR检测方法，其特征在于，25μL PCR反应体系的组成为：2×Taq PCR Master mix 12.5μL，10μmol/L上下游引物各1.0μL，DNA模版2.0μL，补水至25μL。
4.根据权利要求2所述的脊椎动物源性成分的PCR检测方法，其特征在于，PCR反应程序为：94℃4min；94℃30s，58℃30s，72℃30s，35个循环；72℃5min。
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