[发明专利]一种在血浆和血清中检测miRNA的方法

权利要求书

1.一种非诊断性的免抽提的对测试样品进行miRNA检测的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：

(i)提供一测试样品，所述测试样品为血浆和血清样品，将所述测试样品和预处理缓冲液混合，形成第一混合物，其中所述预处理缓冲液包括非离子型表面活性剂；

(ii)将所述第一混合物进行加热处理，得到经处理的第二混合物；和

(iii)将所述第二混合物直接用作模板，检测所述测试样品中的miRNA的种类和/或含量。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(i)中，所述预处理缓冲液包括一种或多种选自下组的非离子型表面活性剂：吐温20(TWEEN-20)、吐温21(TWEEN-21)、吐温40(TWEEN-40)、吐温60(TWEEN-60)、吐温61(TWEEN-61)、吐温80(TWEEN-80)、吐温81(TWEEN-81)、吐温85(TWEEN-85)、Triton X-100、NP-40、或其组合。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(i)中，所述预处理缓冲液的pH为6-9，较佳地，7-9，更佳地，7-8。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述预处理缓冲液还包括Tris-HCl缓冲液。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述预处理缓冲液还包括金属螯合剂。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述金属螯合剂选自下组：EDTA、EGTA、或其组合。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(ii)中，所述加热温度为60-80℃，较佳地，70-75℃。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(iii)中，用荧光定量PCR的方法检测测试样品中的miRNA的含量。

9.一种miRNA组合物，其特征在于，所述组合物包括如下miRNA或由如下miRNA构成：miR-20b、miR-106a、miR-16、miR-671、miR-151、miR-433、和miR-409。

10.如权利要求9所述组合物的用途，其特征在于，用于制备检测乳腺癌转移的诊断试剂或试剂盒。