[发明专利]硫黄素T适配体、其筛选方法及应用

权利要求书

1.一种硫黄素T适配体的筛选方法，其特征在于包括以下步骤：

1）将单链DNA文库和第一连接物标记的捕获链杂交，并将形成的杂交文库与第二连接物标记的载体孵育，使所述杂交文库固定到所述载体上，所述第一连接物和第二连接物能够特异性结合；

2）将游离的核酸序列和与捕获链结合能力差的核酸序列从所述载体上洗脱，之后以硫黄素T溶液将与硫黄素T特异性作用的富集库洗脱；

3）收集所述富集库并进行PCR扩增，获得筛选文库；

4）以所述筛选文库作为单链DNA文库，重复进行步骤1）～步骤3）的操作，直至获得序列如SEQ ID No.3所示的硫黄素T适配体。

2.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于：所述单链DNA文库的序列如SEQ IDNo.1所示，该序列中的n为随机碱基。

3.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于：所述捕获链的序列如SEQ ID No.2所示。

4.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于：所述第一连接物和第二连接物选自生物素及链霉亲和素，所述载体包括琼脂糖树脂。

5.一种硫黄素T适配体，其特征在于它的序列如SEQ ID No.3所示。

6.一种KRAS基因突变检测探针对，其特征在于包括第一探针和第二探针，将SEQ IDNo.3所示核酸序列一分为二形成两个裂解序列后，在该两个裂解序列的末端分别连接KRAS突变基因互补序列而形成所述第一探针、第二探针。

7.权利要求5所述硫黄素T适配体或权利要求6所述KRAS基因突变检测探针对在制备KRAS基因突变检测传感器、试剂盒或检测系统中的用途。

8.一种KRAS基因突变检测传感器，其特征在于包括：将权利要求5所述硫黄素T适配体的序列一分为二并形成两个裂解序列后，在该两个裂解序列的末端分别连接KRAS突变基因互补序列而形成的第一探针、第二探针。

9.一种试剂盒，其特征在于包括：权利要求6所述的KRAS基因突变检测探针对；以及，硫黄素T。

10.一种KRAS基因突变检测系统，其特征在于包括：

权利要求6所述KRAS基因突变检测探针对，用以与待检测的KRAS基因共同孵育而形成待检测体系；

硫黄素T，用于与所述待检测体系共同孵育；以及，

荧光光谱仪，用于检测所述待检测体系在与硫黄素T共同孵育前后的荧光强度变化。