[发明专利]一种靶向抗癌基因-质粒及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种靶向抗癌基因-质粒，其特征在于，该基因-质粒是含有肿瘤特异性启动子的质粒，并携带有肿瘤治疗基因，所述的肿瘤治疗基因选自抑癌基因、细胞因子基因、促细胞凋亡基因，毒素蛋白基因、血管抑制基因和自杀基因中的一种或二种，所述的质粒为真核表达质粒。

2.如权利要求1所述的基因-质粒，其特征在于，所述肿瘤特异性启动子是端粒酶逆转录酶启动子，甲胎蛋白启动子，癌胚抗原启动子，前列腺特异性抗原启动子和乳腺癌组织特异性启动子中的一种。

3.如权利要求1所述的基因-质粒，其特征在于，所述的携带有肿瘤治疗基因，是同时携带两个不同的肿瘤治疗基因；或者是携带一个肿瘤治疗基因和一个能对肿瘤治疗基因表达产物进行修饰加工的蛋白酶基因。

4.如权利要求3所述的基因-质粒，其特征在于，所述肿瘤治疗基因之间或肿瘤治疗基因和蛋白酶基因之间以核糖体进入位点相连接。

5.如权利要求1所述的基因-质粒，其特征在于，所述抑癌基因为p53、PTEN、Rb、NF1、VHL或APC；所述细胞因子基因为IL-2、IL-12、IL-24、GM-CSF、INF-α、INF-β、INF-γ；所述促细胞凋亡基因为TRAIL、Smac、Omi、Bax、Caspase-3、Caspase-7或Eorf4；所述毒素蛋白基因为蜂毒肽melittin、蝎毒BMK、核糖体失活蛋白gelonin、芋螺毒素CTX；所述自杀基因为cd或tk；所述血管抑制剂基因为血管内皮抑素、血管生成抑素k1-4、血管生成抑素k1-3、血纤维蛋白溶酶原k5或sflt-1。

6.如权利要求3所述的基因-质粒，其特征在于，所述蛋白酶基因为Enterokinase、Thrombin、FactorXa、TEVprotease或HRV3CProtease。

7.一种靶向抗癌基因-质粒的构建方法，其特征在于包括以下步骤：将肿瘤特异性启动子，两个肿瘤治疗基因或者一个肿瘤治疗基因和一个负责对肿瘤治疗基因表达产物进行修饰加工的蛋白酶基因依次克隆到真核表达质粒中，两个基因之间以核糖体进入位点连接；所述的肿瘤治疗基因选自抑癌基因、细胞因子基因、促细胞凋亡基因，毒素蛋白基因、血管抑制基因和自杀基因。

8.如权利要求7所述的靶向抗癌基因-质粒的构建方法，其特征在于所述抑癌基因为p53、PTEN、Rb、NF1、VHL或APC；所述细胞因子基因为IL-2、IL-12、IL-24、GM-CSF、INF-α、INF-β、INF-γ；所述促细胞凋亡基因为TRAIL、Smac、Omi、Bax、Caspase-3、Caspase-7或Eorf4；所述毒素蛋白基因为蜂毒肽melittin、蝎毒BMK、核糖体失活蛋白gelonin、芋螺毒素CTX；所述自杀基因为cd或tk；所述血管抑制剂基因为血管内皮抑素、血管生成抑素k1-4、血管生成抑素k1-3、血纤维蛋白溶酶原k5或sflt-1。

9.如权利要求7所述的靶向抗癌基因-质粒的构建方法，其特征在于肿瘤特异性启动子为端粒酶逆转录酶启动子，甲胎蛋白启动子，癌胚抗原启动子，前列腺特异性抗原启动子和乳腺癌组织特异性启动子中的一种。

10.如权利要求1-6中任一项所述的靶向抗癌基因-质粒在制备抗肿瘤药物中的应用；

所述的靶向抗癌基因-质粒与其它化合物组成药用组合物，所述其它化合物选自：化学治疗药物，生物毒素，免疫抑制化合物，单克隆抗体。