[发明专利]一种用于串珠藻的培养基及其应用

说明书

本发明提供了一种用于串珠藻的培养基及其应用。串珠藻培养基的主要组成成分包括NaNO₃，K₂HPO₄,KH₂PO₄,MgSO₄.7H2O,CaCl₂,NaCl,PIV金属溶液,维生素B12溶液，维生素H溶液，维生素B1溶液，青霉素‑链霉素溶液和蒸馏水。利用该培养基，通过对野外采集取得的新鲜串珠藻藻体进行实验室人工培养，保持了串珠藻的室内生活状态。本发明解决了之前串珠藻属研究只限于野外采集生长种，而不能进行人工培养，故而不能进行后续生活史观察、分子生物学分析等难题。

技术领域

本发明涉及藻类培养基，具体属于淡水红藻串珠藻的培养基及其应用。

背景技术

串珠藻属是典型的淡水生红藻类群，生境条件苛刻，一般在清冷洁净的水体中固着生长，固着基质为沙土、河床或其他植物体，而且只有在环境因素变化不大，相对较稳定的水体中才能生长，如冷泉、井水、溪流等，呈点状分布状态。串珠藻对环境的适应性非常脆弱，导致该类群分布罕见。目前关于串珠藻的实验室培养还未有报道，对其研究仅限于野外采集样本之后，用福尔马林溶液固定进行形态学观察，或用硅胶干燥保存进行分子生物学研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种适合串珠藻生长的培养基，另一目的在于提供一种串珠藻的培养方法，最终实现对野外采集到的串珠藻进行实验室人工培养。

本发明提供的一种适合串珠藻生长的培养基，组分及其浓度：NaNO₃ 2.90-2.94mM，K₂HPO₄ 0.41-0.44mM，KH₂PO₄ 1.27-1.31mM，MgSO₄.7H₂O 0.29-0.31mM，CaCl₂ 0.15-0.18mM，NaCl 0.42-0.44mM，PIV金属溶液5.9-6.1mL/L，维生素B12溶液0.8-1.1 mL/L，维生素H溶液0.8-1.1mL/L，维生素B1溶液0.8-1.1mL/L，青霉素-链霉素溶液0.008-0.009 mL/L。

所述的PIV金属溶液的组分及其含量：Na₂EDTA.2H₂O 1.9-2.1mM，FeCl₃.6H₂O0.35-0.37mM，MnCl₂.4H₂O 0.19-0.22mM，ZnCl₂ 0.035-0.038mM，CoCl₂.6H₂O 0.0082-0.0084mM，Na₂MoO₄.2H₂O 0.015-0.018mM。

所述的维生素B12溶液通过如下方法制得：于200mLdH₂O中加入pH7.8的HEPES缓冲液2.39-2.41g和维生素B12 0.025-0.027g。

所述的维生素H溶液通过如下方法制得：于200mLdH₂O中加入pH7.8的HEPES缓冲液2.39-2.41g和维生素H 0.004-0.005g。

所述维生素B1溶液通过如下方法制得：于200mLdH₂O中加入pH7.8的HEPES缓冲液2.39-2.41g和维生素B1 0.066-0.068g。

本发明提供的一种串珠藻培养基的制备方法，包括如下步骤：

1)于灭菌的1L容器中加900mL蒸馏水，搅拌下，按照上述培养基组分及其浓度计算各组分加入量，将除了维生素以外的各组分加入上述容器中；