[发明专利]一种巯基蛋白酶的提取方法有效
| 申请号： | 201610068612.3 | 申请日： | 2016-02-01 |
| 公开（公告）号： | CN105505900B | 公开（公告）日： | 2019-10-11 |
| 发明（设计）人： | 蓝平;廖安平;何日梅;蓝丽红;张金彦;李媚;孙锦;周烈;周珍珍 | 申请（专利权）人： | 广西民族大学 |
| 主分类号： | C12N9/36 | 分类号： | C12N9/36;C12N9/50 |
| 代理公司： | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人： | 薛琦;张佶颖 |
| 地址： | 530007 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 巯基 蛋白酶 提取 方法 | ||
1.一种巯基蛋白酶的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将木薯淀粉磁性微球，与含有巯基蛋白酶的溶液混合后进行振荡吸附；（2）将步骤（1）的反应液进行磁性分离后，将木薯淀粉磁性微球进行洗脱，即可；
所述的巯基蛋白酶为木瓜蛋白酶；所述的洗脱的洗脱液为：pH为4.5~6.5，且含0.9~1.1mol/L NaCl的醋酸和醋酸盐缓冲液；
所述的振荡吸附的温度为25~40℃；
所述的含有巯基蛋白酶溶液的pH值为7~8。
2.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述的振荡吸附为采用恒温摇床进行振荡吸附。
3.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述的振荡吸附的转速为100~200 r/min。
4.如权利要求3所述的提取方法，其特征在于，所述的振荡吸附的转速为150 r/min。
5.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述的振荡吸附的温度为30~35℃。
6.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述的木薯淀粉磁性微球与所述的巯基蛋白酶的质量比为2.5:1~12.5:1。
7.如权利要求6所述的提取方法，其特征在于，所述的木薯淀粉磁性微球与所述的巯基蛋白酶的质量比为5:1~12:1。
8.如权利要求6所述的提取方法，其特征在于，所述的木薯淀粉磁性微球与所述的巯基蛋白酶的质量比为7.5:1~10:1。
9.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，
所述的含有巯基蛋白酶溶液为将所述的巯基蛋白酶溶于Tris-HCl缓冲液中得到的含有巯基蛋白酶溶液。
10.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述的含有巯基蛋白酶溶液中所述的巯基蛋白酶的浓度为0.5~1mg/mL。
11.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，
当所述的木薯淀粉磁性微球的用量为0.2g，巯基蛋白酶为木瓜蛋白酶，且所述的含木瓜蛋白酶的溶液为20 mL，所述的木瓜蛋白酶浓度为1 mg/mL时，所述的振荡吸附的时间为10~300min。
12.如权利要求11所述的提取方法，其特征在于，
当所述的木薯淀粉磁性微球的用量为0.2g，巯基蛋白酶为木瓜蛋白酶，且所述的含木瓜蛋白酶的溶液为20 mL，所述的木瓜蛋白酶浓度为1 mg/mL时，所述的振荡吸附的时间为60 min。
13.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，
所述的洗脱液的pH为5。
14.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述的洗脱液中NaCl的浓度为1.0mol/L。
15.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述的醋酸盐为醋酸钠。
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