[发明专利]一种布美诺肽的固相合成方法

权利要求书

1.一种布美诺肽的固相合成方法，包括如下步骤：

(a)：Rink Amide Resin与长链脂肪羟基酸HO-(CH₂)_n-COOH偶联合成HO-(CH₂)_n-CONH-Rink Amide Resin；

(b)：依照布美诺肽序列，在偶联剂存在条件下，依次偶联Fmoc-Lys(Mtt)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Arg(pbf)-OH，Fmoc-D-Phe-OH，Fmoc-His(Boc)-OH，Fmoc-Asp(O-2-Phipr)-OH，Fmoc-Nle-OH，Fmoc-Nle-OH偶联完成后脱除Fmoc保护基，以乙酸酐/吡啶进行乙酰化，得AC-Nle-Asp(O-2-Phipr)-His(Boc)-D-Phe-Arg(pbf)-Trp(Boc)-Lys(Mtt)-O-(CH₂)_n-CONH-Rink Amide Resin；

(c)：采用TFA/DCM溶液，选择性脱除Lys侧链保护基Mtt，Asp侧链保护基O-2-Phipr，得AC-Nle-Asp-His(Boc)-D-Phe-Arg(pbf)-Trp(Boc)-Lys-O-(CH₂)_n-CONH-Rink AmideResin；

(d)：在偶联剂存在条件下进行树脂上环化，得：AC-Nle-[Asp-His(Boc)-D-Phe-Arg(pbf)-Trp(Boc)-Lys]_cycle-O-(CH₂)_n-CONH-Rink Amide Resin；

(e)：在裂解剂存在条件下，将肽树脂裂解及侧链脱保护，得：AC-Nle-[Asp-His-D-Phe-Arg-Trp-Lys]_cycle-O-(CH₂)_n-CONH₂；

(f)：以乙腈/水将AC-Nle-[Asp-His-D-Phe-Arg-Trp-Lys]_cycle-O-(CH₂)_n-CONH₂溶解，在碱性条件下酯键水解，溶液调酸后得布美诺肽粗肽；

(g)：布美诺肽粗肽经过纯化，冻干，得布美诺肽精肽。

2.根据权利要求1所述的一种布美诺肽的固相合成方法，其特征在于，步骤(a)中，所述长链脂肪羟基酸HO-(CH₂)_n-COOH为8-羟基辛酸或16-羟基十六酸，n等于7或15。

3.根据权利要求1所述的一种布美诺肽的固相合成方法，其特征在于，步骤(a)中，所述Rink Amide Resin的替代度为0.4～0.6mmol/g。

4.根据权利要求1所述的一种布美诺肽的固相合成方法，其特征在于，所述步骤(b)和步骤(d)中偶联剂为DMAP/DIC/HOBT，DMAP/DIC/HOAT，DIC/HOBT，DIC/HOAT，HBTU/HOBT/DIPEA，HATU/HOAT/DIPEA中的一种。

5.根据权利要求1所述的一种布美诺肽的固相合成方法，其特征在于，步骤(c)中，所述TFA/DCM溶液，TFA所占体积比为3～5％。

6.根据权利要求1所述的一种布美诺肽的固相合成方法，其特征在于，步骤(e)中，所述裂解试剂为加入体积比1-5％清除剂的TFA溶液，所述清除剂为苯甲醚、苯甲硫醚、乙二硫醇、巯基乙醇、苯酚、水、三异丙基硅烷中的一种或几种。

7.根据权利要求1所述的一种布美诺肽的固相合成方法，其特征在于，步骤(f)中，所述乙腈/水体系中，乙腈所占的比例为5～15％，使用的碱为氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化锂中的一种。