[发明专利]同时测定地榆类制剂中没食子酸和(+)-儿茶素含量的HPLC方法

说明书

技术领域

本发明涉及药品的检测，具体涉及同时测定地榆类制剂中没食子酸和(+)-儿茶素含量的HPLC方法。

背景技术

地榆(拉丁学名：SanguisorbaofficinalisL.)是蔷薇科地榆属多年生草本植物，纺锤形粗壮跟，短柄小叶，紫红色花瓣，果实包藏萼筒内。别名“黄爪香”、“玉札”、“玉豉”或“酸赭”等。分布在亚洲北温带、广布于欧洲以及中国，生长于海拔30米至3000米的地区，常生于灌丛中、山坡草地、草原、草甸及疏林下，已由人工引种栽培。

地榆也是中草药，性寒，味苦酸，无毒；归肝、肺、肾和大肠经。有凉血止血，清热解毒，培清养阴，消肿敛疮等功效。

地榆升白片是目前较为常见的地榆类制剂，它由地榆单味药加工制成的片剂，具有升高白细胞数量的作用，临床上常作为化疗期间的辅助用药，也可用于治疗精神病药所致的白细胞减少症、干扰素治疗乙型肝炎所致的白细胞减少症。

地榆升白片制剂标准收载于《国家中成药标准汇编》口腔肿瘤儿科分册，具体制法为：取地榆，粉碎成细粉，加入淀粉、蔗糖和糊精，混匀，制成颗粒，干燥，压片，包糖衣或薄膜衣，即得。由于没食子酸(gallicacid)是地榆药材的主要药材成分之一，该标准的含量测定项下测定了没食子酸的含量。然而，(+)-儿茶素((+)-catechin)同样是地榆药材中很重要的一个活性成分，其具有降低辐射对造血组织的损伤，促进造血功能恢复的作用。因此，实际中也有必要对地榆升白片中的(+)-儿茶素的含量同时进行监控，以更真实地反映药品的内在质量。

然而，目前也没有对于地榆类制剂中没食子酸和(+)-儿茶素含量的测定方法报道，更没有对于地榆升白片中没食子酸和(+)-儿茶素含量的测定方法报道。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种同时测定地榆类制剂中没食子酸和(+)-儿茶素含量的HPLC方法，它包括以下步骤：

(1)制备没食子酸和(+)-儿茶素的对照品溶液：取没食子酸和(+)-儿茶素对照品，混合，用甲醇或乙醇分别配制成具有浓度梯度的对照品溶液；

(2)制备供试品溶液：取地榆类制剂或其粉末，除去包衣，甲醇或乙醇提取，过滤，得供试品溶液；

(3)分别将供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪进行检测；

色谱条件如下：

色谱柱：C18色谱柱；

检测波长：280nm；

流动相：流动相A为甲醇，流动相B为磷酸体积浓度为0.03％～0.2％的水溶液，梯度洗脱；

梯度洗脱程序如下：

0～18min，流动相A的体积分数从5％线性变化到14％；18～50min，流动相A的体积分数从14％线性变化到21％；50～53min，流动相A的体积分数从21％线性变化到55％；53～55min，流动相A的体积分数从55％线性变化到5％；55～65min，流动相A的体积分数保持在5％；

(4)绘制标准曲线，计算地榆类制剂中的没食子酸和(+)-儿茶素的含量。

进一步地，所述色谱条件的柱温为25℃～35℃。更进一步地，所述柱温为30℃。

进一步地，所述色谱条件的流速1.0mL/min。

进一步地，所述色谱柱的规格为：内径4.6mm，长度250mm，填料粒径5μm。更进一步地，所述色谱柱为岛津InertsilODS-3。

进一步地，步骤(1)中，所述甲醇的浓度是5％。

进一步地，步骤(2)中，所述提取是回流提取。

进一步地，步骤(2)中，所述甲醇的浓度是50％。

进一步地，步骤(2)中，所述样品与甲醇的重量体积比为0.12g/mL。

进一步地，步骤(3)中，所述流动相B为磷酸体积浓度为0.05％的水溶液。

进一步地，步骤(3)中，所述色谱条件的进样量为20μL。

进一步地，所述地榆类制剂是以地榆原粉为原料，加上药学上可接受的辅料制备得到的制剂。更进一步地，所述制剂是片剂。更进一步地，所述片剂是地榆升白片。

本发明中，所述的“甲醇”、“乙醇”均包括它们任意浓度下的水溶液。

本发明通过对色谱条件的优化，使没食子酸和(+)-儿茶素的色谱峰与杂质色谱峰分离良好，并且线性关系优异，精密度、稳定性和重复性试验的RSD均小于2％。其中，没食子酸的检测限达到0.62ng，平均回收率达98.99％；(+)-儿茶素的检测限达到12.20ng，平均回收率达101.09％。