[发明专利]高致病性副溶血弧菌快速检测引物及试剂盒在审
申请号: | 201610072436.0 | 申请日: | 2016-02-02 |
公开(公告)号: | CN105624299A | 公开(公告)日: | 2016-06-01 |
发明(设计)人: | 姚学良;徐晓丽;张振奎;包海岩;蔡琰 | 申请(专利权)人: | 天津市水产技术推广站 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 陆艺 |
地址: | 300221 *** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 致病性 溶血 弧菌 快速 检测 引物 试剂盒 | ||
1.高致病性副溶血弧菌快速检测引物,其特征是由外引物和内引物组成,所述外引物由SEQ IDNO.1所示的外引物上游引物和SEQIDNO.2所示的外引物下游引物组成;所述内引物由SEQ IDNO.3所示的内引物上游引物和SEQIDNO.4所示的内引物下游引物组成。
2.高致病性副溶血弧菌快速检测试剂盒,其特征是包括:
(1)TE缓冲液,其组成为20mmol/LTris-HCl,2mmol/LEDTA,溶剂是蒸馏水,pH=8.0;
(2)BstDNA聚合酶:浓度为8U/μl的BstDNA聚合酶;
(3)LAMP反应液,每24μlLAMP反应液的组成为:2.5μl10×反应缓冲液;3μl浓度为 2.5mmol/L的dNTP;1μl浓度为5μmol/L的由SEQIDNO.1所示的外引物上游引物,1μl浓度 为5μmol/L的由SEQIDNO.2所示的外引物下游引物,1μl浓度为40μmol/L的由SEQIDNO.3 所示的内引物上游引物,1μl浓度为40μmol/L的由SEQIDNO.4所示的内引物下游引物;1μl 钙黄绿素与锰离子形成的配合物、13.5μlDEPC水;
(4)阳性对照膜片,用下述方法制成:吸取高致病性副溶血弧菌培养液将FTA膜片充分润 湿后室温干燥,放入盛有200μlTE缓冲液的洗涤管中震荡洗涤1次,每次2min,充分干燥;
(5)阴性对照膜片,用下述方法制成:吸取DEPC水将FTA膜片充分润湿后室温干燥,放 入盛有200μlTE缓冲液的洗涤管震荡洗涤1次,每次2min,充分干燥;
(6)无菌封装的FTA膜片、研磨棒、吸管,采集管,洗涤管,检测管。
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