[发明专利]一种模式拟南芥的嫁接方法有效

专利信息
申请号: 201610075067.0 申请日: 2016-02-03
公开(公告)号: CN105706873B 公开(公告)日: 2019-03-08
发明(设计)人: 杨英杰;王然;贺育娟;葛孟清 申请(专利权)人: 青岛农业大学
主分类号: A01G31/00 分类号: A01G31/00;A01G2/30
代理公司: 济南舜源专利事务所有限公司 37205 代理人: 申传晓
地址: 266000 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 模式 拟南芥 嫁接 方法
【权利要求书】:

1.一种模式拟南芥的嫁接方法,其包括以下步骤:

A、将拟南芥种子经表面消毒后,接种于高温高压灭菌的添加4%蔗糖的1/2 MS 固体培养基中,经4 ℃低温春化处理后,置于弱光下处理3天-5天,再转入光下培养3天-5天,待下胚轴生长至6毫米-8毫米,将下胚轴粗壮、长势一致、两片子叶平展且真叶刚刚萌发的6天-8天苗龄的拟南芥植株用于嫁接;

B、用镊子分别取出作为砧木和接穗的拟南芥实生苗,置于事先准备的多个无菌1.2%浓度琼脂糖凝胶板上,将另一无菌1.2%浓度琼脂糖凝胶板盖于相应实生苗下胚轴上,并于下胚轴偏上部位置迅速切断嫁接材料,要求切口圆整,并保证接穗材料的下胚轴部分较短,而砧木材料的下胚轴部分较长;

C、将切好的嫁接材料转入0.7-0.8%浓度琼脂凝胶上,将琼脂凝胶切除一段宽为0.5厘米-1厘米的长条;将长为5毫米、内径/外径为0.5/1.5的塑料管以垂直于琼脂凝胶切口边缘的方式平置于凝胶上,并保证塑料管管口距离切口的距离为2毫米;将砧木与接穗分别插入塑料管内进行固定,使材料紧密接触,并使接穗材料的叶片部分置于切除条状凝胶处;切割一块大于砧木根部面积的1/2 MS+ 3%蔗糖固体培养基,盖在砧木的根部,挤出气泡,使凝胶与培养基紧密结合,形成嫁接体;

D、将嫁接体置于21 ℃环境下垂直培养7天,待嫁接口愈合后,将成活的嫁接苗转入以1/4 MS为液体培养基的水培设备中继续培养,期间接穗下胚轴如有侧根发出,则及时剪去。

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