[发明专利]一种大樱桃快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物组织培养方法，具体涉及一种大樱桃快繁方法。

背景技术

樱桃属于蔷薇科落叶乔木果树，是中国北方落叶果树中继中国樱桃之后果实成熟最早的果树树种，因此，早有“春果第一枝″的美誉。在调节鲜果淡季，均衡周年供应和满足人民生活的需要方面，有着特殊的作用。大樱桃果实含有较丰富的营养物质，对人的身体有一定的营养价值。中医药学认为，大樱挑具有调中补气，祛风湿的功能。大樱桃管理用工少，生产成本低，经济效益高，适宜在辽宁、山东、陕西、河南、河北等地栽培。

随着植物组织培养技术的发展，植物细胞具有“全能性”得到了广泛证实，因此，在离体的条件下用离体的方法培养花药，人为的改变小孢子的发育途径，使其配子体发育途径终止，转向孢子体发育，通过器官发生或胚发生的途径，形成完整的植株。关于大樱桃花粉离体培育的报道很少，且诱导率、成活率低。

发明内容

本发明针对目前的问题，提供一种大樱桃快繁方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种大樱桃快繁方法，包括，

1)花蕾采集保存：于晴天在大樱桃植株花序上采取无病虫、生长良好的单核发育早期的适龄花蕾一株或多株，将取好的花蕾迅速用冰盒保存；

2)花药消毒：将步骤1中保存在冰盒内的花蕾在超净工作台上浸入70-75％浓度的酒精中消毒10-15s，快速取出立即浸入饱和次氯酸钠溶液中消毒8min以上，在消毒过程中轻轻晃动烧杯使其消毒充分，最后用无菌水冲洗多次后放在滤纸上吸干花蕾表面水分；

3)剥取花蕾中的花药，然后将剥取的花药接种愈伤组织诱导培养基，置于摇床上进行培养，使其在摇动的过程中花粉自然地散落于培养基中，培养10-20天，挑出花药壁，继续培养，获得愈伤组织；

4)接种分化培养基，培养获得试管小苗；

5)接种生根培养基，筛选获得单体植株。

优选地，所述的愈伤组织诱导培养基：1/2MS+6-BA0.8mg/L+ZT0.6mg/L+NAA0.4～0.6mg/L+甘氨酸1.1mg/L+盐酸硫胺素1.2mg/L+烟酸0.7mg/L+琼脂1000～2000mg/L+蔗糖20～30g/L+酵母提取物2000～3000mg/L，在18-20℃、光照强度为1800LX、光照时间8小时/天的条件下培养。

优选地，所述的分化培养基为3/4MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5～0.7mg/L+7％蔗糖，在20-22℃、光照强度为2000LX、光照时间12小时/天的条件下培养。

优选地，所述的生根培养基为1/2MS+IBA0.1～0.3mg/L+NAA0.3～0.5mg/L+琼脂40～60g/L+蔗糖2000～3000mg/L+维生素B11～3mg/L+活性炭质量比0.1％～0.3％+酵母提取物5000～7000mg/L，在23-25℃、光照强度为2200LX、光照时间为15小时/天的条件下培养。

优选地，还包括炼苗移栽，具体为待长5条以上根时开瓶炼苗4～6d，将瓶内苗取出，用0.003％～0.005％质量比IAA溶液浸苗根基部5～8min，将组培苗移栽到基质中，浇足定根水，盖上小拱棚膜保温保湿，前期温度保持在15～20℃，湿度80～90％，7～15d后揭膜，逐步延长揭膜时间，直至不覆膜，每隔2～3周浇施0.1％～0.3％重量比尿素和0.1％～0.3％质量比KH₂PO₄或稀薄粪水，将成活苗移栽；所述的基质为：腐叶土∶珍珠岩∶蛭石＝2∶2∶1体积比。

优选地，揭膜期间平均温度保持15℃～25℃，湿度保持80％～95％。

本发明的有益效果是：本发明采用大樱桃花药为外植体，调整去花药的时期，进行花药愈伤组织的诱导，采用光照培养和暗培养相结合的方法交替培养，获得花粉植株。本发明培养基愈伤组织增殖明显，易形成花粉植株。关键是找到了适宜的培养方法，用本发明的方法对大樱桃的离体花粉进行培养，具有花粉萌发成胚时间短、加倍效率高、产量大及较容易获得优良变异育种中间材料等优点，在育种材料提纯复壮、种质资源创新、多倍体育种及花粉发育进程研究等方面内容，具有较大的实用价值。

具体实施方式

下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。

本发明实施例包括：

实施例一：一种“早大果”大樱桃快繁方法，包括，