[发明专利]基于21个线粒体SNP位点的法医学快速检测试剂盒

说明书

本发明提供了一种基于21个线粒体SNP位点的法医学快速检测试剂盒及其在个体识别中的应用。该试剂盒包括：富集引物混合物；单碱基延伸引物混合物；扩增试剂：dNTPs、快速Taq聚合酶；核酸纯化柱；SNaPshot反应混合液；Hi‑Di甲酰胺；GeneScan^TMSize Standards‑120LIZ；阳性对照：DNA 9947A；阴性对照：ddH₂O。本发明提供的试剂盒成本低廉、操作简单、灵敏度高、检测结果准确、适用性广，能够在1.5～2小时，通过单管反应即可获得检测结果，对人类生物检材进行个体识别，为案件破获争取宝贵时间。

技术领域

本发明属于法医学领域，具体涉及一种基于21个线粒体SNP位点的法医学快速检测试剂盒及其应用。

背景技术

法医DNA分析是应用现代DNA分析技术，分析DNA遗传标记在群体中的分布与传递规律，确定分析样品的一致性与遗传关系，为侦查破案和司法审判提供证据的一门科学技术。其分析对象主要涉及人体各种体液(斑)、组织、毛发以及表皮脱落细胞等。法医DNA分析的主要任务是个体识别与亲子鉴定。目前法医DNA分析中用于个体识别的试剂盒主要有两类：一类基于短串联重复序列(short tendem repeat，STR)分型技术；另一类基于SNP分析技术。

STR广泛存在于人类基因组中，具有高度多态性。对于一个特定的个体，染色体上某个特定位置的重复序列的重复次数是固定的，而对于不同的个体在同一位置处的重复次数可能不同，这就构成了人群中这些重复序列的多态性。由于人类基因组中这种重复序列非常多，通过对这种多态性的检测，就可以明确区分个体与个体的不同，确定父母子的亲缘关系。联合应用16个STR位点，其个体识别率可达0.999。尽管STR分型技术具有很高的灵敏性与可靠性，然而其在法医学领域中的应用仍然具有一定程度的局限性。一方面，在实际检案工作中，生物性检材中的DNA分子经常由于潮湿、暴晒以及其他环境因素的影响而发生断裂、损坏、部分丢失，从而无法进行有效的STR分型。为解决此问题发展出的小片段短串联重复序列(miniSTR)分型技术所能分析的DNA片段长度范围也只能缩小到80～150bp，对于长度更小的高度降解DNA片段，该技术仍具有一定局限性。另一方面，由于受到片段长度和荧光染料种类的限制，在一个符合扩增体系中能够同时扩增的STR基因座数量多为4个，要达到个体识别效能，必须进行多系统的复合扩增，这就使得该技术在微量检材的应用中受到限制。