[发明专利]治疗B细胞白血病及B细胞淋巴瘤的治疗组合物

说明书

本发明提出了一种转基因淋巴细胞、一种构建体和一种治疗癌症的治疗组合物，本发明所提出的转基因淋巴细胞的细胞表面免疫检查点被沉默以及表达嵌合抗原受体。本发明所提出的转基因淋巴细胞的细胞因子分泌增多，对CD19⁺肿瘤细胞的靶向杀伤作用强，尤其对B细胞淋巴瘤及B细胞白血病的CD19⁺肿瘤细胞定向杀伤作用显著提高。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体地，本发明涉及一种T淋巴细胞、一种慢病毒、一种转基因淋巴细胞、一种构建体、一种用于治疗癌症的治疗组合物和一种提高淋巴细胞活性的方法。

背景技术

肿瘤可以避免免疫监视，肿瘤细胞通过诱导免疫抑制性受体的表达，而关闭其受到免疫反应。在免疫调节机制方面,激活的细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)表达负调控的监管机制,即在细胞表面表达免疫检查点分子，其中，一种主要的免疫检查点分子——程序性细胞死亡受体1(PD1)表达在活化CTLs上，其与肿瘤细胞上表达的程序性死亡配体1(PD-L1B7-H1)相互作用,可以抑制抗肿瘤T细胞反应。许多肿瘤,包括淋巴瘤、肺癌、卵巢癌、黑色素瘤、胰腺肿瘤,表达PD-L1。PD-L1与其配体PD1的结合，会导致T淋巴细胞增生性反应的下调,细胞因子的分泌减少,和T细胞的无能或凋亡。细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA4)是另一个T细胞的关键负面调节因子，其可抑制T细胞活化，抑制机制是通过与表达在抗原递呈细胞上的配体B7.1、B7.2(CD80和CD86)在相互作用实现。

T细胞攻击并摧毁肿瘤的潜力一直是公认的。过继T细胞疗法是将来自体内的T细胞在体外活化、扩张，随后回输入体内进行自身免疫治疗的一种疗法。

然而，过继T细胞疗法仍有待进一步开发。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。

本发明是基于发明人的下列发现而完成的：

CD19靶向性的嵌合抗原受体T细胞可有效地杀伤CD19⁺的恶性B细胞。但许多CD19⁺恶性B细胞淋巴瘤患者，仍然对于CD19靶向性的嵌合抗原受体T细胞疗法没有反应。本发明针对上述问题，提出了一种携带沉默细胞表面免疫检查点的核酸分子和编码CD19靶向性的嵌合抗原受体的核酸分子的构建体和以此构建体导入后形成的转基因淋巴细胞，本发明提出的构建体和转基因淋巴细胞用于过继T细胞的免疫治疗，可以大大提高T淋巴细胞的细胞因子产生以及对肿瘤细胞的杀伤能力，尤其对CD19⁺恶性B细胞淋巴瘤或白血病的CD19⁺肿瘤细胞的杀伤效果显著增强。

在本发明的第一方面，本发明提出了一种T淋巴细胞。根据本发明的实施例，所述T淋巴细胞的细胞表面免疫检查点被沉默；以及表达嵌合抗原受体，其中，所述嵌合抗原受体包括：胞外区，所述胞外区包括单链抗体的重链可变区和轻链可变区，所述单链抗体特异性识别抗原CD19；跨膜区，所述跨膜区与所述胞外区相连，并且嵌入到所述T淋巴细胞的细胞膜中；胞内区，所述胞内区与所述跨膜区相连，并且所述胞内区包括CD28的胞内段以及CD3ζ链。根据本发明的实施例，本发明提出的T淋巴细胞的细胞因子产生以及对肿瘤细胞杀伤能力显著增强，尤其对CD19⁺恶性B细胞淋巴瘤或白血病的CD19⁺肿瘤细胞的杀伤效果大大提高。

在本发明的第二方面，本发明提出了一种慢病毒。根据本发明的实施例，所述慢病毒携带下列核酸分子：编码嵌合抗原受体的核酸分子，所述嵌合抗原受体具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，所述编码嵌合抗原受体的核酸分子具有SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列；以及沉默细胞表面免疫检查点的核酸分子，所述沉默细胞表面免疫检查点的核酸分子的核苷酸序列为选自SEQ ID NO：3～68的至少之一。