[发明专利]一种预防人或动物弓形虫病的DNA疫苗有效
| 申请号： | 201610079069.7 | 申请日： | 2016-02-04 |
| 公开（公告）号： | CN105561343B | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 周剑;何深一;吕刚;王琳;赵晗婷 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | A61K48/00 | 分类号： | A61K48/00;A61K39/012;A61P33/02;C12N15/12;C12N15/79 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 董洁 |
| 地址： | 250061 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 预防 动物 弓形虫 dna 疫苗 | ||
【权利要求书】：
1.一种预防人或动物弓形虫病的DNA疫苗，其特征是：将弓形虫棒状体蛋白19的基因插入真核表达载体pEGFP-C1中，构建重组质粒pEGFP-C1-ROP19，该重组质粒pEGFP-C1-ROP19即为弓形虫ROP19DNA疫苗；
其中，所述弓形虫棒状体蛋白19的基因插入pEGFP-C1中BamH I和Kpn I位点间。
2.权利要求1所述的预防人或动物弓形虫病的DNA疫苗的制备方法，其特征是：包括以下步骤：
以弓形虫ROP19基因为DNA模板，通过聚合酶链反应扩增ROP基因片段，将其插入到真核表达载体pEGFP-C1中BamH I和Kpn I位点间构建重组质粒pEGFP-C1-ROP19，提取含有目的基因的重组质粒，获得弓形虫ROP19DNA疫苗。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征是：PCR扩增采用的引物如下：上游引物：5＇-CGGGGTACCATGAGAAGGCTGCTGCTTTC-3′，如SEQIDNO：1所示；下游引物：5′-CGGGATCCTCACTGAGATCTGGATGC-3′，如SEQIDNO：2所示。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征是：聚合酶链反应的条件为：95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸3min，共30个循环。
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