[发明专利]一种防治禽流感H5N1的重组杆状病毒疫苗的制备方法

权利要求书

1.一种表达禽流感病毒血凝素HA基因的重组H5N1病毒疫苗株，其保藏编号为CCTCCNO:V201606；

其通过以下步骤获得：

1)pS-ITRs-HA质粒的构建，

2)pS-ITRs-HA质粒转化E.coli DH10 Bac，

3)重组杆状病毒穿梭载体转染Sf9昆虫细胞，

4)重组杆状病毒的扩增；

其中步骤1)包括以下步骤：

a)用PCR方法扩增鸡HA基因，并将鸡HA基因，连接至pMD18-T载体上得到pT-HA质粒；

b)将VSV-GED片段插入pFastBac1质粒中，获得pFB-V质粒；

c)将gp64sp片段插入pFB-V质粒中，获得pFB-GV质粒；

d)将ITRs-L片段插入pFB-GV质粒中，获得pFB-GV-ITRs-L质粒；

e)将CMV片段插入pFB-GV-ITRs-L质粒中，获得pFB-GV-ITRs-L-C质粒；

f)将WPRE片段插入pFB-GV-ITRs-L-C质粒中，获得pS-ITRs-L质粒；

g)将ITRs-R片段插入pS-ITRs-L质粒中，获得pS-ITRs质粒；

h)将质粒pT-HA与质粒pS-ITRs进行连接，获得pS-ITRs-HA质粒。

2.一种重组H5N1病毒疫苗，其中包含根据权利要求1所述的表达禽流感病毒血凝素HA基因的重组H5N1病毒疫苗株作为活性成分。

3.根据权利要求1所述的表达禽流感病毒血凝素HA基因的重组H5N1病毒疫苗株或根据权利要求2所述的疫苗在制备预防和或治疗H5N1禽流感的药物中的用途。