[发明专利]促进人脐带间充质干细胞向软骨细胞分化的方法在审
| 申请号： | 201610084124.1 | 申请日： | 2016-02-04 |
| 公开（公告）号： | CN105647856A | 公开（公告）日： | 2016-06-08 |
| 发明（设计）人： | 李洲;么秀华;黄慧玲;孙雪莲;朱建民;魏华英;李召雨;刘江;周洪锐;刘晓华;李昀地;杨延瑞;范维佳 | 申请（专利权）人： | 关节动力安达（天津）生物科技有限公司;天津中新科炬生物制药有限公司;天津市神经外科研究所 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 天津市鼎和专利商标代理有限公司 12101 | 代理人： | 崔继民 |
| 地址： | 300308 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 促进 脐带 间充质 干细胞 软骨 细胞 分化 方法 | ||
1.一种促进人脐带间充质干细胞向软骨细胞分化的方法，其特征在于， 包括以下步骤：
(1)人脐带间充质干细胞的培养：将废弃的人脐带组织剪碎，用质量体 积比浓度0.1％的二型胶原酶消化成单个的细胞，离心；用间充质干细胞完全 培养液重悬细胞，过筛，收集细胞悬液，于37℃、体积分数为5％CO2和95％空 气、绝对湿度条件下进行培养，每隔1天换培养液，得高纯度的脐带间充质干 细胞；
(2)向软骨细胞诱导分化：将培养至第3代的脐带间充质干细胞收集并 离心，用间充质干细胞完全培养液重悬细胞接种到底面积为25cm2培养瓶中, 细胞完全铺满瓶底后，培养液更换为软骨细胞诱导液进行向软骨细胞的分化， 细胞分化第1天开始加入0.1-10mM牛磺酸，共培养16天即得分化的软骨细胞。
2.根据权利要求1所述的促进人脐带间充质干细胞向软骨细胞分化的方 法，其特征在于，所述步骤(2)中细胞分化第1天开始加入0.1-10mM牛磺酸， 每星期换液2次，共培养16天即得分化的软骨细胞。
3.根据权利要求1或2所述的促进人脐带间充质干细胞向软骨细胞分化 的方法，其特征在于，细胞分化第1天开始加入5mM牛磺酸。
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