[发明专利]克百威生物条形码免疫分析测定试剂盒及其应用

说明书

本发明涉及食品安全检测免疫分析技术领域，具体而言，涉及一种克百威生物条形码免疫分析测定试剂盒，所述试剂盒包括盒体，所述盒体内包含有：克百威标准品、克百威磁性纳米探针、单标胶体金纳米探针、克百威双标胶体金纳米探针、DNA生物芯片、银染试剂。本申请提供的试剂盒可以简便、快速、灵敏、特异、稳定地检测待测样品中的克百威含量，实验重现性好，便于操作和生产。

技术领域

本发明涉及食品安全检测免疫分析技术领域，具体而言，涉及一种克百威生物条形码免疫分析测定试剂盒及其应用。

背景技术

克百威为不可逆胆碱酯酶抑制剂，对人、畜禽、鱼、鸟等毒性极高，一般加工成颗粒剂或种衣剂进行土壤或种子处理。药剂在土壤中残效期长，植物能通过根、茎、叶或种子吸收传导，在叶缘积累较多，误食染药植物可能引起中毒。土壤中的克百威还可能通过泾流和渗透污染地面和地下水源。因此，建立高效快速的克百威检测技术，对于环境和农副产品中克百威残留的监测及克百威中毒的准确快速诊断和有效治疗，保障人类健康具有重要意义。

免疫分析方法的作用和地位目前已得到国内外学者的广泛认可，免疫分析方法的研究也是检测方法研究最热门的领域之一。在免疫分析方法领域中，我国在酶联免疫分析方法方面开展了较为深入的研究，包括半抗原合成、抗体制备、标记物偶联、反应体系中各种理化性质对免疫分析方法的影响及半抗原结构与其所制备得到抗体之间的构效关系等方面。近年来，我国学者在荧光免疫分析、化学发光免疫分析、生物传感器和生物条形码免疫分析方法方面也开展了较多的研究工作。

基于磁性纳米粒子的生物条形码免疫分析方法，利用生物条形码信号放大作用及磁性纳米粒子的分离富集作用，其最低检出限相对于ELISA方法提高了几个数量级，致使其从诞生以来，便获得了科学界的高度关注。生物条形码指的是可结合在纳米粒子上的大量相同序列的DNA片段。该方法最早是用于对前列腺特异性抗原(Prosta tespec if icAntigen，PSA)的检测。该方法主要包括：磁性纳米粒子表面修饰PSA单克隆抗体，胶体金纳米探针表面修饰起信号放大作用的生物条形码和针对PSA的另一种抗体。在PSA存在时，磁性纳米粒子、PSA、胶体金纳米探针通过抗原抗体反应形成“三明治”夹心复合结构。形成的复合物经磁场分离，富集的磁性纳米探针通过高温低盐法变性，释放生物条形码，通过检测解离下来的生物条形码含量便可以间接得到PSA的含量。

生物条形码分析方法近十年来在痕量蛋白质和核酸检测方法得到了快速的发展，通过与免疫反应相结合建立的生物条形码免疫分析方法，将免疫分析方法的检测限提高到了一个新的高度。然而该方法建立至今，只能通过构建“三明治”结构模式实现对蛋白质等大分子物质的检测。由于克百威为小分子化合物，只有一个抗原结合位点，因此目前生物条形码免疫分析方法采用的“三明治”结构模式基本不能适用于克百威的检测。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种克百威生物条形码免疫分析测定试剂盒，使用该试剂盒可以特异地定量检测水中或食品中克百威含量。该试剂盒通过竞争反应体系进行检测，克服了目前生物条形码免疫分析方法采用的“三明治”结构模式基本不能适用于克百威的检测的缺陷。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种克百威生物条形码免疫分析测定试剂盒，所述试剂盒包括盒体，所述盒体内包含有：

克百威标准品、克百威磁性纳米探针、单标胶体金纳米探针、克百威双标胶体金纳米探针、DNA生物芯片、银染试剂。

克百威(Carbofuran)分子式：C12H15NO3；CAS号：1563-66-2。