[发明专利]一种胃癌基因工程疫苗及其制备方法无效
申请号: | 201610087656.0 | 申请日: | 2016-02-16 |
公开(公告)号: | CN105727282A | 公开(公告)日: | 2016-07-06 |
发明(设计)人: | 赵顺英 | 申请(专利权)人: | 赵顺英 |
主分类号: | A61K39/39 | 分类号: | A61K39/39;A61K39/00;A61K38/19;A61P35/00;C12N15/27;C12N15/86 |
代理公司: | 长沙星耀专利事务所 43205 | 代理人: | 许伯严 |
地址: | 810016 青海省*** | 国省代码: | 青海;63 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胃癌 基因工程 疫苗 及其 制备 方法 | ||
1.一种胃癌基因工程疫苗,其特征在于,包括GM-CSF基因修饰的人胃癌细胞和佐剂;
所述GM-CSF基因修饰的人胃癌细胞通过如下步骤制备:
步骤S1,用含GM-CSF基因的重组仙台病毒上清液感染人胃癌细胞,得到GM-CSF基因修饰的人胃癌细胞;
步骤S2,对步骤S1得到的GM-CSF基因修饰的人胃癌细胞灭活并进行热休克处理;
所述佐剂通过如下步骤制备:
步骤S1,取对数生长期的人胃癌细胞接种于含体积百分比10%FBS的RPMI1640细胞培养液中,加入15~25μmol/mL的如下结构式的化合物(Ⅰ)培养36~48h得细胞培养液,
步骤S2,将细胞培养液离心弃上清液,沉淀悬浮于生理盐水中,再放入液氮中冷冻5~10分钟,再将冷冻物取出,放入37℃温水融化,如此反复冻融3~5次,即可得所述佐剂。
2.根据权利要求1所述的胃癌基因工程疫苗,其特征在于,所述佐剂通过如下步骤制备:步骤S1,取对数生长期的人胃癌细胞5×107个接种于1ml含体积百分比10%FBS的RPMI1640细胞培养液中,加入20μmol/mL的所述化合物(Ⅰ)培养42h得细胞培养液;步骤S2,将细胞培养液离心弃上清液,沉淀悬浮于1ml生理盐水中,再放入液氮中冷冻5~10分钟,再将冷冻物取出,放入37℃温水融化,如此反复冻融3~5次,即可得所述佐剂。
3.根据权利要求1或2所述的胃癌基因工程疫苗,其特征在于:所述人胃癌细胞为SGC-7901人胃癌细胞系。
4.根据权利要求1或2所述的胃癌基因工程疫苗,其特征在于:所述灭活方法为采用60Co照射灭活。
5.根据权利要求1或2所述的胃癌基因工程疫苗,其特征在于,所述热休克处理方法为:将人胃癌细胞置于42℃~65℃条件下温浴0.5h~2h。
6.权利要求1所述的胃癌基因工程疫苗在制备预防或治疗胃癌的药物中的应用。
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