[发明专利]可用于诊断系统性红斑狼疮的检测器件、检测试剂盒及诊断方法

说明书

技术领域

本发明主要涉及免疫检测技术。具体而言，本发明涉及可用于诊断系统性红斑狼疮的多肽检测器件、检测试剂盒及诊断方法。

背景技术

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种以自身抗体产生和免疫复合物形成为特征的自身免疫性疾病，临床表现为全身症状及多系统多器官受累的症状，严重影响患者的寿命和生活质量。我国SLE的发病率为70.1/10万，并且有逐年上升的趋势。SLE的早期诊断、早期治疗是改善预后的关键。然而我国自身免疫性疾病诊断水平较低，并且诊断试剂主要依赖进口，造成诊断费用昂贵，增加了国家和患者的医疗成本，也不利于向基层医院普及。因此，建立稳定、快捷、适合推广的检测方法，是目前需要解决的问题。

目前临床开展的SLE相关自身抗体常规检测项目主要有抗核抗体(ANA)、抗dsDNA抗体、抗ENA抗体(包括抗sm、抗U1RNP、抗SSA/Ro、抗SSB/La、抗rRNP、抗Scl-70和抗Jo-1等)、抗核抗体和抗磷脂抗体等。对于临床疑似SLE的病人应进行自身抗体检测。在美国风湿病学会修订的SLE分类标准中，免疫学异常和自身抗体阳性包括抗Sm抗体、抗dsDNA抗体、抗磷脂抗体和ANA阳性。现有技术中的检测方法由于特异性和灵敏度不高，还不存在较理想的血清学检测指标。比如现有技术中Scofield RH等人报道SSA或者说抗核抗体阳性率只有60％左右(Anti-Ro fine specificity defined by multiple antigenic peptides identifies componentsof tertiary epitopes. Clin Exp Immunol 109:480-7.)。如果能够建立SLE特异的“自身抗体谱”检测方法，同时检测多种特异性抗体，提高检出率及准确性,将为SLE的诊断、分类、疗效观察和预后判断提供可靠的依据，这将具有重要的临床意义。因此，寻找一种敏感性强、特异性高而又简便易行的血清学检测方法，对SLE的早期诊断及治疗具有重要意义。

同时，大量自身抗体的出现是自身免疫性疾病的重要特征之一，但由于其发病机制尚不明确，难以直接利用自身抗原检测抗体。抗原表位(epitope)是抗原分子中识别、结合抗体的基础，因此是检测抗体的实际有效组分。以抗原表位肽或其模拟肽(mimotope)作为诊断工具有以下几个优势：1)可以提高诊断的灵敏度和特异性，避免了生物大分子易产生的非特异性结合(Deroo S et al(2001)Comb Chem High Throughput Screen 4:75–115)；2)扩大疾病诊断的范围，对于研究较少或难以体外应用的自身抗原如核酸抗原、多糖抗原、脂类抗原，以模拟肽作为天然抗原的替代物进行诊断，也可以获得与天然抗原表位一致的结果(Bruce G(1997)Proc Natl Acad Sci USA 94：1955–1960；Jinaping Q et al(1999)Hyridoma 18(1)：103–109)；3)多肽制备、应用的成本低、易于质控。因此，自身抗原表位肽或其模拟肽(Meloen RH et al(2000)J Mol Recognit 13:352-359)的获得是制备自身抗体的多肽检测试剂的基础。

发明内容

本发明的目的在于提供新的可用于诊断SLE的检测器件、诊断试剂盒，以及诊断SLE的方法。此外，本发明还提供特定多肽的组合在制备用于SLE疾病的试剂盒或检测器件中的用途。

现有技术中关于SSA或者抗核抗体阳性率只有60％左右，本发明人提供了 11条多肽表位。在以受试者来源的生物样本是否对所述11条多肽中的至少两条或两条以上有响应作为判定受试者是否为SLE患者的指标的情况下，可以高达89.4％的灵敏度(且准确性达到92.4％)诊断和筛查SLE。

因此，本发明一方面提供一种检测器件，其包括固体载体，以及独立地连接于该固体载体上的下述的多肽：

SEQ ID NO：1所示的多肽；

SEQ ID NO：2所示的多肽；

SEQ ID NO：3所示的多肽；

SEQ ID NO：4所示的多肽；

SEQ ID NO：5所示的多肽；

SEQ ID NO：6所示的多肽；

SEQ ID NO：7所示的多肽；

SEQ ID NO：8所示的多肽；

SEQ ID NO：9所示的多肽；

SEQ ID NO：10所示的多肽；和