[发明专利]细胞膜微囊泡MVs和外泌体EXs的分离提取方法在审
申请号: | 201610093446.2 | 申请日: | 2016-02-19 |
公开(公告)号: | CN105716928A | 公开(公告)日: | 2016-06-29 |
发明(设计)人: | 陈颜芳;肖湘;王景菊;陈姬;柳华 | 申请(专利权)人: | 武汉大复生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N1/34 | 分类号: | G01N1/34 |
代理公司: | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人: | 唐正玉 |
地址: | 430074 湖北省武汉市东湖高新区光谷大*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞膜 微囊泡 mvs 外泌体 exs 分离 提取 方法 | ||
1.细胞膜微囊泡MVs和外泌体EXs的分离提取方法,其特征在于按以下步骤进行:
a、抽取外周血液样品3-10ml置于抗凝管保存;用磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)稀释2-4倍,进行离心得到上清液血浆;b:对上清液血浆再次进行离心分离,沉淀物为MVs,c:对步骤b的上清液血浆进行超速离心分离,沉淀物为EXs。
2.根据权利要求1所述的细胞膜微囊泡MVs和外泌体EXs的分离提取方法,其特征在于:用磷酸盐缓冲生理盐水PBS稀释3倍,混匀后用400r/s的转速离心,35分钟得到上清液血浆。
3.根据权利要求2所述的细胞膜微囊泡MVs和外泌体EXs的分离提取方法,其特征在于:所述步骤b为:对上清液血浆再进行两次离心分离,第一次离心的转速2000r/s,20分钟,保存上清液进行第二次离心,第二次离心的转速20000r/s,120分钟,沉淀物为MVs。
4.根据权利要求3所述的细胞膜微囊泡MVs和外泌体EXs的分离提取方法,其特征在于:所述步骤c为:对得到沉淀物为MVs的上清液血浆再进行离心分离,离心的转速169000r/s,6小时,离心后沉淀物为EXs。
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