[发明专利]一种菌类中β-葡聚糖的检测方法

权利要求书

1.一种菌类中β-葡聚糖的检测方法，所述检测方法由菌类中β-葡聚糖的红外光谱 定性方法和菌类中β-葡聚糖的高效液相色谱定量方法组成，其特征在于：

所述红外光谱定性方法包括，

1)将所述菌类样品与KBr按照1:10-50的质量比例混合研磨至均匀，置于样品杯中， 压成透明薄片；

2)以仪器内置背景为参比，扫描波长范围4000-450cm^-1，扫描累积次数16-32次， 分辨率4cm^-1，得到所述样品的红外光谱；

所述定量方法包括，

a)准确称取0.4g样品至20ml的带螺帽的试管中，加入6.0ml的37％的盐酸(质量 百分比)，拧紧螺帽并震荡，得到均一的悬浮液；

b)将试管放入30℃水浴45min，每15min震荡混合1次，将悬浮物转移到200ml 杜氏瓶中，用100-120ml的水分几次洗涤试管，洗涤液并入杜氏瓶中；

c)将杜氏瓶放入高压灭菌锅，121℃，60min，取出冷却后，用氢氧化钠溶液将溶 液pH调至6-7，最后定容到250ml，过滤，取滤液作为供试品溶液；

d)取供试品溶液5-20μl，注入液相色谱仪，仪器条件：高效液相色谱仪 Agilent1260，蒸发光散射检测器Agilent1260InfinityELSD，色谱柱6.5mm×300mm waterssugarpak-1，柱温70-90℃，流动相为100％水，流速为0.5-1ml/min，蒸发光 散射检测器检测条件EvaporatorTemp：70-90℃，NebulizerTemp：70-90℃，GasFlow Rate：0.8-1.0SLM，得到所述样品的高效液相色谱。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述红外光谱定性方法还包括步 骤3)判断该菌类样品中是否含有β-葡聚糖。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤3)中所述判断该菌类 样品中含有β-葡聚糖的标准为：

I)、在750-1000cm^-1，分辨率为4cm^-1，波长范围中有特征吸收峰；

II)、指纹区889±10cm^-1的位置有特征吸收峰；

满足以上I)和II)特征即判断为该菌类样品中含有β-葡聚糖。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中的菌 类样品与KBr的质量比为1:20。

5.根据权利要求1-3中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述步骤2)中扫描 累积次数是16次。

6.根据权利要求1-3中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述步骤d)中供试 品溶液为10μl。

7.根据权利要求1-3中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述步骤d)中流速 为0.5ml/min。

8.根据权利要求1-3中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述步骤d)中柱温 80℃，蒸发光散射器检测条件EvaporatorTemp：80℃,NebulizerTemp:80℃，Gas FlowRate：0.9SLM。

9.根据权利要求1-3中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述菌类为姬松茸。