[发明专利]一种新城疫鸡胚接种疫苗的制备方法及应用

权利要求书

1.一种鸡胚接种疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：接种：将新城疫病毒TS09-C株生产用毒种进行适当稀释，接种发育良好的9～10日龄SPF鸡胚，每胚尿囊腔内接种0.1ml，接种后密封针孔，置36～37℃继续孵育，不必翻蛋；

步骤2：孵育和观察：鸡胚接种后，每日照蛋1次，将在48小时前死亡的鸡胚弃去，48小时后，每4～8小时照蛋一次，死亡的鸡胚随时取出，直到96或120小时，不论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置于2～8℃冷却；

步骤3：收获：将冷却4～24小时的鸡胚取出，用碘酊消毒气室部位，然后以无菌手术剥除气室部卵壳，揭去卵壳膜，剪破绒毛尿囊膜及羊膜，勿使卵黄破裂，吸取鸡胚液，每若干个鸡胚的胚液混合为一组，收获后的胚液置于灭菌瓶中，加入抗生素，在2～8℃冷库处理4小时以上，留样后，结冻保存，在收获胚液的同时，应逐个检查鸡胚，如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者弃去不用；

步骤4：疫苗配制：将无菌检验、病毒含量测定合格的若干组鸡胚液滤过，混合于同一无菌容器内，按规定羽份，加入7％蔗糖、16％脱脂牛奶作稳定剂，同时加入抗生素充分摇匀，定量分装，每羽份病毒含量应不低于10^3.0EID₅₀，分装后迅速进行冷冻真空干燥；

步骤5：疫苗检验：主要包括物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、鉴别检验、安全检验和效力检验。

2.根据权利要求1中所述的鸡胚接种疫苗的制备方法，其特征在于，步骤1中将新城疫病毒TS09-C株稀释至10^－3或10^－4。

3.根据权利要求1中所述的鸡胚接种疫苗的制备方法，其特征在于，步骤3中抗生素的用量为1000u/ml。

4.根据权利要求1中所述的鸡胚接种疫苗的制备方法，其特征在于，步骤4中抗生素的用量为1000u/ml。

5.一种权利要求1所述鸡胚接种疫苗在预防鸡新城疫中的应用。