[发明专利]用于定量检测RPRM基因DNA甲基化试剂盒及方法有效
申请号: | 201610104493.2 | 申请日: | 2016-02-26 |
公开(公告)号: | CN105567850B | 公开(公告)日: | 2019-03-12 |
发明(设计)人: | 陈骐;王瀚泽 | 申请(专利权)人: | 福建师范大学 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350117 福建省福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 定量 检测 rprm 基因 dna 甲基化 试剂盒 方法 | ||
1.用于定量检测RPRM基因DNA甲基化试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包含DNA转化试剂组分:重亚硫酸盐转化反应液,DNA纯化试剂组分:玻璃纤维膜离心柱、结合缓冲液、漂洗缓冲液、脱硫缓冲液、洗脱缓冲液,甲基化检测试剂组分:2×SYBR GREEN I预混反应液、引物RPRM-F与RPRM-R、甲基化阳性对照质粒SM及非甲基化阳性对照质粒SU;
所述DNA转化试剂组分中,重亚硫酸盐转化反应液含5摩尔/升NaHSO3、12.5wt.% 乙二醇二甲醚,pH 5.0;
所述DNA纯化试剂组分中,结合缓冲液含6摩尔/升盐酸胍;漂洗缓冲液含10毫摩尔/升Tris-HCl,pH 6.8,体积分数80%乙醇;脱硫缓冲液含200毫摩尔/升NaOH,100毫摩尔/升NaCl,体积分数30%乙醇,体积分数5%甘油;洗脱缓冲液含10毫摩尔/升Tris-HCl,1毫摩尔/升EDTA,pH 8.0;
所述的引物RPRM-F为:5’-GTTTTAGAAGAGTTTAGTTGTTG-3’;RPRM-R为5’-CTACTATTAACCAAAAACAAAC-3’。
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